利用人工合成XcmⅠ接头盒构建T—载体

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目的采用人工法合成XcmⅠ接头盒,进而构建T-载体。方法用人工方法合成含XcmⅠ酶切位点的寡核苷酸接头,将其插入pBluescript SK Ⅱ(+)质粒的EcoRⅤ位点,以XcmⅠ消化含接头的质粒即构建成T-载体。利用PCR反应扩增PEA全长结构基因,直接克隆入T-载体以验证所构建T-载体的可用性。结果限制性酶切分析、DNA序列测定及PEA基因的克隆等均证实T-载体的构建成功。结论所构建的T-载体可有效用于直接克隆PCR产物。
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