乳牛孕酮人工抗原的制备与鉴定

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采用二环已基碳化二亚胺偶联法将孕酮-11α-半琥珀酸酯(11α-OH-P4-HS)分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)载体偶联,制备乳牛孕酮人工抗原P4-BSA和P4-OVA,并用SDS-PAGE对制备的人工抗原进行测定.再用制备的人工免疫抗原P4-BSA免疫BALB/c小鼠制备免疫血清.用P4-OVA作为ELISA检测抗原,方阵滴定法确定检测抗原的最佳包被浓度,间接ELISA测定免疫血清中抗体的特异性及效价.结果表明,成功制备了乳牛孕酮人工抗原,P4-OVA的最佳包被浓度为5.82
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