【目的】以糖蜜发酵酒精废液为原料,探讨生化黄腐酸的高产发酵工艺技术参数,为生化黄腐酸高效生产提供理论依据。【方法】以白地霉、黑曲霉和短小芽孢杆菌的接种量、接种比例、培养基组成和发酵周期等因素进行单项和正交试验研究,采用硫酸铝絮凝质量法测定发酵液中生化黄腐酸的含量,探索发酵液中生化黄腐酸的含量最高的发酵条件及培养基。【结果】在总接种量为5%的条件下,白地霉、黑曲霉和短小芽孢杆菌的不同接种比例的生化黄腐酸含量为221.2²36.5 g·L^-1,其中以1∶1∶2最佳;添加葡萄糖量在低于50.0 g·L^-1时,随着葡萄糖添加量的增加其生化黄腐酸含量也显著增加,但大于50.0 g·L^-1后,生化黄腐酸含量增加不显著;添加尿素含量在低于15.0 g·L^-1时,随着尿素添加量的增加其生化黄腐酸含量也显著增加。【结论】白地霉∶黑曲霉∶短小芽孢杆菌为1∶1∶2的比例下,接种量为6%的条件下,葡萄糖、尿素和硫酸铵含量分别为50.0,15.0,2.0 g·L^-1;发酵周期为72 h的条件下,生化黄腐酸产量达到最高水平,为278.9 g·L^-1。几个因素对生化黄腐酸产量的影响程度大小顺序依次为:葡萄糖加量>发酵周期>尿素加量>接种量>硫酸铵加量。