人精于表面蛋白P34H的基因克隆及其在睾丸和附睾中表达的半定量分析

来源 :解放军检验医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caoyongtao1985
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目的 克隆精子表面蛋白P34H基因的编码区,为进一步体外表达P34H蛋白做难备。方法 提取人附睾体部总RNA,并以此为模板,进行反转录PCR获得编码P34H蛋白的基因片段。应用T/A克隆策略,将扩增的P34H基因编码区克隆入T载体,并通过双酶切和DNA测序进行鉴定。同时,以β-actin为内参,进行反转录PCR半定量分析,比较P34H在附睾头部、体部和尾部及睾丸组织中的表达量大小。结果 成功地克隆了P34H基因。将P34H的cDNA序列登录GenBank,登录号为AF515625。反转录PCR半定量分析表
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