【摘 要】
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[目的]研究Zeste基因增强子人类同源2 (EZH2)选择性抑制剂GSK126对激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖的影响。[方法]选取20例激素性股骨头坏死患者和20例股骨
【机 构】
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湖北中医药大学附属襄阳市中医医院骨科; 华中科技大学同济医学院附属普爱医院骨科;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81501894)
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[目的]研究Zeste基因增强子人类同源2 (EZH2)选择性抑制剂GSK126对激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖的影响。[方法]选取20例激素性股骨头坏死患者和20例股骨颈骨折患者,无菌条件下抽取患者股骨骨髓,密度梯度离心法体外分离培养MSCs,取第三代细胞实验。实验分为三组:ONFH组为骨坏死患者MSCs,GSK126组为ONFH的MSCs经GSK126干预72h,对照组为股骨颈骨折患者MSCs。MTT检测24、48、72 h三组细胞的增殖能力变化并确定GSK126的最适浓度。测定各组细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)的表达水平。实时定量PCR检测PCNA、cyclinD1、cyclinE1表达,Western blot检测H3K27me3的表达。[结果]与对照组相比,ONFH组细胞增殖能力下降、ROS水平增高,MMP下降,差异有统计意义(P<0.05)。10μmol/L GSK126干预培养72 h后(GSK 126组)能明显促进激素性骨坏死组MSCs增殖,降低ROS水平,提高MMP水平,与ONFH组间的差异有统计学意义(P<0.05),但仍不及对照组,尽管差异无统计学意义(P>0.05)。实时定量PCR结果显示:ONFH组PCNA、cyclinD1、cyclinE1 mRNA水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);10μmol/L GSK126处理后逆转上述mRNA,使其接近对照组水平(P>0.05)。Western blot示ONFH组H3K27me3蛋白水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),GSK126处理后蛋白含量明显降低。[结论]H3K27me3修饰异常可能与激素性股骨头坏死的发病相关,10μmol/L GSK126可逆转其表达,能显著促进MSCs增殖。
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