鸡IL-1βcDNA克隆和序列分析及原位杂交检测

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：IceMilo

【摘要】

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根据国外报道的鸡IL-1β序列,设计引物,以提取的鸡外周血单个核细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增IL-1β cDNA全序列.将RT-PCR产物与pUC19载体相连,转化大肠杆菌,经PCR、酶切分析及

【作者】

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张永霞马学恩王金福

【机构】

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内蒙古农业大学动物科学与医学学院

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

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2003年3期

【关键词】

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鸡 IL-1Β CDNA克隆序列分析原位杂交检测技术 chicken interleukin1β clone sequencing in situ hyb

【基金项目】

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国家自然科学基金

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根据国外报道的鸡IL-1β序列,设计引物,以提取的鸡外周血单个核细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增IL-1β cDNA全序列.将RT-PCR产物与pUC19载体相连,转化大肠杆菌,经PCR、酶切分析及序列测定得知所克隆序列与报道序列同源性达99%以上,证明所克隆基因为目的基因.用地高辛随机引物法标记IL-1β cDNA制备探针,原位杂交检测禽脑脊髓炎病鸡与正常鸡脑组织中IL-1β mRNA表达情况,结果表明脑炎病鸡脑中IL-1β mRNA表达水平高于正常鸡.

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