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目的:通过人工方法将湖北钉螺制备成血吸虫感染性钉螺,确定钉螺感染的最佳条件,建立钉螺人工感染传代的室内株,为研究其感染活性、遗传变异和疫苗等提供实验室依据.方法:用尼龙绢筛集卵法收集日本血吸虫成熟虫卵,常规法孵化毛蚴.将钉螺与毛蚴按不同比例进行感染,感染方式分为个体感染和集体感染.个体感染随机分6组(Ⅰ～Ⅵ组),每组200只钉螺,每只钉螺置单孔内分别感染,钉螺感染毛蚴比例分别为1:0,1:5,1:10,1:15,1:20,1:25;集体感染随机分6组(Ⅶ～Ⅻ组),每组200只钉螺,按组别集中感染,Ⅶ～Ⅻ组钉螺感染毛蚴比例分别同Ⅰ～Ⅵ组.然后对每组钉螺的感染数、死亡数及尾蚴逸出量进行比较,确定最佳感染方法和比例.以第1代人工感染性钉螺逸出的尾蚴感染实验动物,获取成熟虫卵并孵化毛蚴,然后采用个体感染方式,以1:15的比例继续感染钉螺,获得第2代人工感染性钉螺.比较第1代与第2代人工感染性钉螺的感染数、死亡数及尾蚴逸出数.通过动物感染实验,比较人工第1代、第2代感染性钉螺与自然感染性钉螺日本血吸虫成虫发育率、每克粪卵数(fecal eggs per gram, FEPG)及每克肝卵数(liver eggs per gram, LEPG). 结果:个体感染Ⅰ～Ⅵ组的钉螺感染数分别为0±0,22.7±4.2,31.7±4.5,53.0±5.3,39.3±5.9,32.7±4.7;钉螺死亡数分别为21.7±3.1,25.0±3.6,31.3±4.9,44.7±6.5,78.3±9.5,89.7±13.6;钉螺平均逸蚴量为0±0,308.0±96.6,428.1±146.2,527.0±171.1,571.4±148.9,602.9±356.3.集体感染Ⅶ～Ⅻ组,钉螺感染数分别为0±0,12.3±2.5,18.7±4.7,28.3±4.2,33.3±4.7,29.3±5.5;钉螺死亡数分别为22.7±3.8,23.7±4.5,28.3±5.5,47.0±9.5,75.7±8.5,86.3±12.2;钉螺平均逸蚴量为0±0,244.5±57.3,292.3±74.8,347.1±100.8,477.2±142.1,447.3±161.4.用人工制备的第1代感染性钉螺对血吸虫进行人工传代研究,成功获得了人工第2代感染性钉螺,感染率为24.65%,钉螺死亡率为24.50%;与人工第1代钉螺26.65%的感染率及22.35%的死亡率差异均无统计学意义(P>0.05).在尾蚴感染动物试验中,人工第1代、第2代感染性钉螺与自然感染性钉螺的成虫发育率分别为68.50%,73.50%,71.00%,3组间差异无统计学意义(P>0.05);自然感染性钉螺和人工第1代、第2代感染性钉螺的FEPG分别为1 503±269,1 683±233,1 541±117;LEPG分别为6 641±1 819,6 272±1 419,7 263±1 643,3组间比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论:通过用人工感染的方法可以获得日本血吸虫感染性钉螺.个体感染方式优于集体感染方式,感染时钉螺与毛蚴的最佳比例为1:15.人工感染性钉螺经传代后,第1代与第2代钉螺在感染数、死亡数及尾蚴逸出数等方面无明显差别.比较人工第1代、第2代感染性钉螺与自然感染性钉螺的成虫发育率、FEPG及LEPG,差异也无统计学意义,证明人工传代的血吸虫尾蚴(室内株)能达到自然野生株尾蚴的感染效果.