【摘 要】
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目的 对特异区分α6/α3β2β3和α3β2 2种nAChRs亚型的α-CTx LvIA进行研究,确定影响其活性的关键氨基酸位点.方法 通过序列比对,两步法氧化折叠、双电极电压钳和圆二色谱
【机 构】
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海南大学热带生物资源教育部重点实验室,生命科学与药学院,海口市海洋药物重点实验室,海南海口 570228
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目的 对特异区分α6/α3β2β3和α3β2 2种nAChRs亚型的α-CTx LvIA进行研究,确定影响其活性的关键氨基酸位点.方法 通过序列比对,两步法氧化折叠、双电极电压钳和圆二色谱等技术确定LvIA中影响其活性的关键氨基酸位点,并探索该位点对LvIA影响的机制.结果 确定了 LvIA中第5位组氨酸(His,H)的关键作用,当第5位的His分别被丙氨酸(Ala,A)、天冬氨酸(Asp,D)和色氨酸(Trp,W)分别取代后,都会导致LvIA对所有受体亚型的活性丧失.圆二色检测结果表明该位点的变化对LvIA的二级结构没有显著影响.结论 第5位His是维持LvIA 活性的关键氨基酸残基,该氨基酸极性和侧链的变化均会导致LvIA活性的丧失,但是对其二级结构影响较小.LvIA中第5位氨基酸与nAChR的相互作用力是保证其活性的关键.该结论为基于LvIA设计新型专一作用于乙酰胆碱受体的工具探针改造提供了重要信息.
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