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根据猪伪狂犬病毒gD基因的序列,设计和合成了一对特异的可用于检测伪狂犬病毒的PCR引物和一条Taqman荧光探针,采用LightCycle 480荧光定量PCR仪,建立了一种可实时定量检测猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术.该方法的线性范围为1.0×10～1.0×10拷贝,灵敏度可达2拷贝,比常规PCR高100倍.该方法检测时间短,速度快,仪器的运行时间仅为1h,特异性明显高于常规PCR.对15株猪伪狂犬病毒进行了检测,结果均为阳性;与猪细小病毒和鸭瘟病毒无非特异性反应.与病毒分离培养和常规PCR相比较,该方法具有快速、灵敏、特异、定量、重复性好的优点,可望用于临床上伪狂犬病的检测和病毒分布的研究等.