蛋白激酶C对腹膜间皮细胞己糖激酶活性的调控

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目的研究蛋白激酶C ( protein kinase C, PKC ) 对腹膜间皮细胞 ( peritoneal mesothelium cell, PMC ) 己糖激酶 ( hexokinase, HK )活性的调节作用,以及HK活性与PMC对葡萄糖摄取的相关性.方法大网膜取自雄性SD大鼠,胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养及传代,细胞角蛋白抗体的间接免疫荧光染色用于PMC的鉴定; 6-磷酸葡萄糖脱氢酶耦联比色法检测HK活性,观察PKC激活剂--佛波酯( PMA、PDD )及经典型PKC( classical PKC,cPKC )抑制剂--G(o)6976对HK活性的影响;比色法检测培养液内葡萄糖的消耗量作为细胞对葡萄糖净利用指标.结果原代培养的PMC 24 h贴壁,5~8 d融合,形成铺路石样外观,细胞角蛋白在胞浆阳性表达.PMA对HK活性的诱导呈时间和剂量依赖性,并增加了PMC对葡萄糖的净利用.0.01、0.1及1 μmol/L的PMA作用 24 h后,HK活性分别提高30.7 %、59.9 % 及99.1%(P
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