【摘 要】
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目的:构建TAT-EGFP原核表达载体,在E.coliBL21中高效表达并纯化。方法:人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a后得到pET28a-TAT重组质粒,再连接绿色荧光蛋白(EGFP)
【机 构】
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河南省肿瘤病理重点实验室,郑州大学第一附属医院神经内科
【基金项目】
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河南省杰出青年科学基金资助项目074100510001
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目的:构建TAT-EGFP原核表达载体,在E.coliBL21中高效表达并纯化。方法:人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a后得到pET28a-TAT重组质粒,再连接绿色荧光蛋白(EGFP)基因,组成pET28a-TAT-EGFP重组表达子。转化大肠杆菌,IPTG诱导TAT-EGFP融合蛋白表达。表达产物用十二烷基硫钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,组氨酸亲和层析柱纯化融合蛋白。结果及结论:成功地构建了TAT-EGFP融合蛋白的原核表达载体,在诱导后获得了高效表达并纯
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