柱前衍生化RP-HPLC法测定中药全蝎中16种氨基酸含量

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目的:建立柱前衍生化RP-HPLC法测定中药全蝎中16种氨基酸的含量的方法。方法:采用酸水解法制备水解氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生化后进行HPLC分析。采用Ultimate Prime C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相A为0.1 mol·L-1醋酸钠溶液(调pH至6.5)-乙腈(93∶7);流动相B为乙腈-水(8∶2);流速为1.0 mL·min-1;柱温为40℃;检测波长为254 nm;梯度洗脱。结果:氨基酸衍生溶液在36 h内保持稳定,16种氨基酸在线性范围内相关系数r均>0.999 5,加样回收率(n=9)在93.3%~104.6%之间。结论:所建立的检测方法可靠,精密度和重复性良好,可用于全蝎中水解氨基酸的含量测定。
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