大鼠胶质细胞源性神经营养因子的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

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用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以大鼠纹状体总RNA为模板,扩增了大鼠胶质细胞源性神经营养因子(rGDNF)成熟序列的cDNA片段,将此cDNA克隆到载体pGEM-T中,对重组质粒进行限制酶切分析和序列测定,确定为含rGDNFcDNA的重组质粒,将该rGDNFcDNA重组到融合表达载体pGEX—1λT内,在大肠杆菌中获得了较高的表达。 The cDNA fragment of rat glial cell line-derived neurotrophic factor (rGDNF) mature sequence was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) using total RNA of rat striatum as a template. The cDNA clone To pGEM-T vector, restriction analysis and sequence analysis of the recombinant plasmid were carried out to confirm that it was a recombinant plasmid containing rGDNF cDNA. The rGDNF cDNA was recombined into the fusion expression vector pGEX-1λT to obtain higher expression in E. coli .
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