【摘 要】
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目的探讨恒河猴血管内皮细胞 (RMVEC) 移植替代角膜内皮细胞 (CEC) 治疗角膜内皮损伤的可行性。方法实验研究。体外培养增殖RMVEC并用5-溴脱氧尿嘧啶核苷 (Brd U) 标记。将恒河猴9只采用随机数字表法分为两组:实验组 (6只) 、对照组 (3只) 。实验组将体外培养的Brd U标记的RMVEC利用离心沉淀法移植到撕除后弹力层的恒河猴角膜内表面后缝回植床;对照组将撕除后弹力层的术眼角
【机 构】
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目的探讨恒河猴血管内皮细胞 (RMVEC) 移植替代角膜内皮细胞 (CEC) 治疗角膜内皮损伤的可行性。
方法实验研究。体外培养增殖RMVEC并用5-溴脱氧尿嘧啶核苷 (Brd U) 标记。将恒河猴9只采用随机数字表法分为两组:实验组 (6只) 、对照组 (3只) 。实验组将体外培养的Brd U标记的RMVEC利用离心沉淀法移植到撕除后弹力层的恒河猴角膜内表面后缝回植床;对照组将撕除后弹力层的术眼角膜植片原位缝回植床。术后观察各组角膜植片透明情况。术后30、60、90 d分别摘取术眼行病理切片、抗Brd U单克隆抗体免疫组织化学染色、扫描电镜及透射电镜观察RMVEC在角膜植片内表面的分布及细胞超微形态结构。
结果在实验观察期内,实验组角膜植片比对照组角膜植片有较好的透明性,未出现新生血管及大泡性角膜病变。病理学检查发现实验组角膜内表面可见细胞层,抗Brd U单克隆抗体免疫组织化学染色阳性,证实该细胞为培养的Brd U标记的血管内皮细胞;对照组角膜内表面未见细胞样结构。扫描电镜下可见实验组角膜植片内表面可见RMVEC分布均匀,生长良好,呈不规则多边形,表面可见微绒毛,RMVEC间可见少量白细胞,小梁网处部分细胞碎片聚集;对照组角膜内表面呈纤维物质样,未见细胞生长。透射电镜:培养的RMVEC及实验组角膜内表面的RMVEC呈不规则扁圆状,细胞间大量桥粒链接,胞质内细胞器丰富,可见特征性WP小体,提示其具备活体血管内皮细胞的特征与活性,对照组角膜内表面未见细胞结构。
结论RMVEC能够在撕除后弹力层的角膜内表面生长并替代CEC的功能,可能成为治疗角膜内皮损伤的一种新思路。(中华眼科杂志,2013,49:1006-1013)
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