【摘 要】
：
目的:初步探讨IL-7联合IL-2对脐血CD4+CD25-T细胞体外扩增的促进作用,建立稳定的体外培养扩增脐血CD4+CD25-Tregs的培养体系,比较诱导扩增后的CD4+CD25+Tregs和自然分选的CD4
【机 构】
：
河北大学生命科学学院,河北省健海生物芯片技术有限责任公司
论文部分内容阅读
目的:初步探讨IL-7联合IL-2对脐血CD4+CD25-T细胞体外扩增的促进作用,建立稳定的体外培养扩增脐血CD4+CD25-Tregs的培养体系,比较诱导扩增后的CD4+CD25+Tregs和自然分选的CD4+CD25+Tregs对PBMCs功能活性的影响。方法:采用免疫磁珠分选法分选出脐血CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+T细胞;加入不同浓度的细胞因子IL-7结合适当浓度的IL-2作为诱导剂,分析IL-7体外诱导CD4+CD25-T细胞增殖的有效性及最适浓度。我们利用流式细胞术检测体外扩增后的CD4+CD25-T细胞表型变化;MTS法检测体外诱导扩增的CD4+CD25+Tregs及自然分选的CD4+CD25+Tregs分别对成人外周血中单个核细胞增殖的抑制作用;RT-PCR方法分析体外诱导扩增的CD4+CD25+Tregs及自然分选的CD4+CD25+Tregs FOXP3基因、IL-10基因和TGF-β基因的cDNA表达的变化。结果:经3周体外培养、各组细胞均有明显的扩增。IL-7诱导组的扩增最强。体外抑制试验显示体外扩增的Tregs对成人外周血中单个核细胞有明显的抑制作用,IL-7联合IL-2诱导CD4+CD25-T细胞生成的CD4+CD25+Tregs具有较自然分选的CD4+CD25+Tregs稍弱的免疫抑制功能,其中IL-7浓度为4 ng/ml,IL-2浓度为2 000 U/ml时诱导CD4+CD25-T细胞生成的CD4+CD25+Tregs杀伤活性最强。结论:成功建立了CD4+CD25+Tregs的体外培养体系,联合应用IL-7、大剂量的IL-2和CD3/CD28单抗是体外诱导扩增CD4+CD25-T细胞成为CD4+CD25+Tregs的优选方法,并且扩增倍数高、可持续高表达CD4及CD25细胞表型。
其他文献
目的:观察浆细胞性乳腺炎(Plasma cell mastitis,PCM)患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(CD4+CD25+CD127-Treg)数量和功能变化,以探讨PCM免疫病理机制。方法:将58例浆细
采用激光拉曼光谱仪对波罗的海、多米尼加、缅甸三个地区的琥珀样品进行了拉曼光谱测试分析,描述了拉曼光谱的位置、形态、相对强度,分析了振动模式,同时对某些分子基团如ν(
<正>白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)是最初在小鼠Th2细胞分泌物中发现的一种独特的细胞因子,因其能抑制Th1细胞细胞因子的合成而引起了国内外学者的广泛关注。随着医学
酒店人员流失率过高成为我国酒店业普遍面临的问题之一,对酒店的正常经营带来了较大的影响,本文从员工自身、酒店、社会三个方面分析了造成这一现象的主要原因,并提出了相应
房地产企业的发展是中国经济发展的一个重要组成部分,是涉及到国民经济安全稳定发展的重要行业。本文将以万科企业股份有限公司为研究对象,对其过去五年的企业发展轨迹进行分
随着市场经济的不断发展,上市公司中关联方关系和关联方交易已经在集团内部普遍存在,这就不能避免在上市公司中利用关联方交易进行操纵利润的问题,这就给投资者的决策带来了
总量上,利率债供给压力主要集中在6—7月,单月净融资或在万亿元附近;供给偏弱的时点是一季度和9月及以后,单月净融资可能仅在4000亿元附近。结构上,国债方面,超长债的净融资
目的:研究α-Thujone对CD3AK细胞增殖及杀伤功能的影响。方法:从人外周血来源的PBMC按常规方法培养成CD3AK细胞,用不同浓度的α-Thujone处理CD3AK细胞,CCK-8法检测CD3AK细胞
怒江是我国仅剩两条尚未开发的处女江之一(另一条是雅鲁藏布江),怒江的开发与否引来理论界的热烈讨论,通过从理论上分析争议的主要之处,对怒江流域现状和水能开发潜力进行研
通过数据统计、相关分析方法 ,对保山市PM10的监测数据与各气象因素的关系进行分析 ,得到一些初步结果 ,为减轻和防止污染提供参考。