【摘 要】
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目的:探讨shRNA靶向沉默精氨酸琥珀酸合成酶（ASS1）基因后对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响。方法:应用RT-PCR及Western blot检测5种肝癌细胞系中ASS1的表达情况;将
【机 构】
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郑州大学第一附属医院药学部,郑州大学第一附属医院感染科
【基金项目】
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河南省科技厅创新人才基金项目(124100510010);郑州大学第一附属医院青年基金项目(2013年)
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目的:探讨shRNA靶向沉默精氨酸琥珀酸合成酶（ASS1）基因后对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响。方法:应用RT-PCR及Western blot检测5种肝癌细胞系中ASS1的表达情况;将shRNA-ASS1转染入SMMC-7721细胞（shRNA-ASS1组）,同时设空白对照组和阴性对照组,观察转染后细胞的生长变化,运用Western blot鉴定其对ASS1基因的沉默效果;采用CCK-8法检测各组转染3 d后的细胞增殖情况;流式细胞术检测各组转染24 h后细胞凋亡的情况。结果:ASS1 mRNA和蛋白在Changliver、SMMC-7721、QGY-7703、HepG2和Hep G3B细胞中的表达差异有统计学意义(FmRNA=1 129.140,F蛋白=1 114.240,P均<0.001),ASS1在SMMC-7721和Hep G3B肝癌细胞系中呈高表达。CCK-8实验显示,与阴性对照组及空白对照组相比,shRNA-ASS1组细胞增殖率降低（F=7.176,P=0.007）。细胞凋亡实验显示,shRNA-ASS1组细胞凋亡率高于阴性对照组和空白对照组（F=88.120,P<0.001）。结论:沉默ASS1基因可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡。
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