【摘 要】
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目的 确定临床脓液标本中1株革兰阴性球杆菌K8756的分类学位置.方法 抽取患者深部脓肿物,置于Amies培养基室温保存、运输.脓液标本分区划线接种血平板、巧克力平板,置于35 ℃含5%CO2培养箱.采用API、Vitek2细菌鉴定系统,结合传统形态学检查、手工生化实验对分离株进行鉴定.从纯培养物提取脂肪酸、甲基化,采用气相色谱仪分析脂肪酸成分.PCR扩增16SrRNA基因并测序,对所测得的核酸序
【机 构】
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目的 确定临床脓液标本中1株革兰阴性球杆菌K8756的分类学位置.方法 抽取患者深部脓肿物,置于Amies培养基室温保存、运输.脓液标本分区划线接种血平板、巧克力平板,置于35 ℃含5%CO2培养箱.采用API、Vitek2细菌鉴定系统,结合传统形态学检查、手工生化实验对分离株进行鉴定.从纯培养物提取脂肪酸、甲基化,采用气相色谱仪分析脂肪酸成分.PCR扩增16SrRNA基因并测序,对所测得的核酸序列进行同源性比对及系统发育分析.结果 血平板、巧克力平板分离到1株缓慢生长的革兰阴性球杆菌K8756.API 20NE生化编码为1245045(72 h),提示为人苍白杆菌;Vitek2 GN鉴定卡重复实验3次,提示为皮氏罗尔斯顿菌或支气管炎鲍特菌.但基于16SrRNA基因序列的系统发育分析表明,菌株K8756属于玫瑰单胞菌的成员,与该属的合格发表种黏液玫瑰单胞菌MDA5527T核酸匹配度高达100%(菌株K8756的GenBank登录号为GU207841).其菌落形态、表型特征及主要细胞脂肪酸成分亦与黏液玫瑰单胞菌相似.结论 菌株K8756(=GIMCC 1.0030)在分类学上属于黏液玫瑰单胞菌.16S rRNA基因序列分析是鉴定临床疑难菌株及新发现菌株的重要手段。
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