【摘 要】
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目的研究体内及体外高氧暴露对Ⅱ型肺泡上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells，AEC Ⅱ)转分化水平的影响，旨在阐明支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia，BPD)肺上皮损伤的发生机制。方法新生Wistar大鼠生后随机分为对照组(吸入空气)和模型组(吸入氧浓度为85%)，于7 d、14 d、21 d进行动物模型肺组织取材并分离AEC
【机 构】
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目的研究体内及体外高氧暴露对Ⅱ型肺泡上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells，AEC Ⅱ)转分化水平的影响，旨在阐明支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia，BPD)肺上皮损伤的发生机制。
方法新生Wistar大鼠生后随机分为对照组(吸入空气)和模型组(吸入氧浓度为85%)，于7 d、14 d、21 d进行动物模型肺组织取材并分离AEC Ⅱ。细胞标本检测Ⅰ型肺泡上皮细胞(type Ⅰ alveolar epithelial cells，AEC Ⅰ)特异性标志物水通道蛋白5(aquaporin 5，AQP5)及AEC Ⅱ标志物表面活性蛋白C(surfactant protein C，SP-C)表达。从正常新生鼠肺分离的AEC Ⅱ在体外原代培养24 h后随机分为常氧组(21% O2)和高氧组(85% O2)，培养48 h后收集细胞，应用免疫荧光双标染色观察AQP5和SP-C表达及定位，Western blot方法检测AQP5和SP-C蛋白表达水平，荧光实时定量PCR方法检测AQP5和SP-C mRNA表达水平。
结果BPD模型组大鼠AEC Ⅱ中AQP5蛋白表达从7 d开始较对照组增多，SP-C蛋白表达从14 d开始较对照组减少。模型组中AQP5 mRNA从7 d开始表达增多，SP-C mRNA从7 d开始表达减少(P<0.05)，且随高氧暴露时间延长两组间差异更加显著。由正常新生鼠肺分离的AEC Ⅱ进行体外原代培养后，免疫荧光双染可见高氧组较常氧组AQP5表达增多，SP-C表达减少，双染细胞明显增多。蛋白和mRNA定量检测结果均提示高氧组较常氧组AQP5表达增多，SP-C表达减少(P<0.01)。
结论无论体内还是体外高氧暴露下，AEC Ⅱ特异性标志物SP-C表达下调，而AEC Ⅰ特异性标志物AQP-5表达上调，提示AEC Ⅱ过度转分化参与高氧肺损伤后的修复过程。
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