抗CCR7单链抗体的筛选及初步鉴定

来源 :中国药理学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pingzidege

【摘要】

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目的从噬菌体抗体库中筛选抗CCR7单链融合抗体,并对其生物学特性进行初步检测。方法PCR检测大肠杆菌中ScFv基因插入率;琼脂糖凝胶电泳鉴定SfiI和NotI双酶切质粒的结果;分别以

【作者】

：

樊春波李少林彭志平罗弋曹辉王洁

【机构】

：

重庆医科大学放射医学教研室,重庆医科大学附属第一医院核医学科

【出处】

：

中国药理学通报

【发表日期】

：

2010年3期

【关键词】

：

噬菌体抗体库单链抗体 CCR7 乳腺癌淋巴结转移抗体筛选 phage antibody library single chain variable fra

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目的从噬菌体抗体库中筛选抗CCR7单链融合抗体,并对其生物学特性进行初步检测。方法PCR检测大肠杆菌中ScFv基因插入率;琼脂糖凝胶电泳鉴定SfiI和NotI双酶切质粒的结果;分别以乳腺癌细胞及CCR7多肽片段为靶抗原对抗体库进行4轮和3轮筛选富集。将阳性克隆转化E.coliHB2151进行可溶表达。抗体亲和层析纯化后,经Western blot鉴定,通过ELISA法检测可溶性ScFv抗体的免疫活性。免疫细胞化学和放射免疫显像鉴定scFv抗体与乳腺癌细胞结合的特异性。结果ScFv基因插入率为90%（18/

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