【摘 要】
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克隆乙肝病毒X基因,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.用PCR方法从结乙肝病毒基因组扩增出HBX基因片段,克隆至pMD18-T载体中.序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pProExHTa并在
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克隆乙肝病毒X基因,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.用PCR方法从结乙肝病毒基因组扩增出HBX基因片段,克隆至pMD18-T载体中.序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pProExHTa并在大肠杆菌BL21中表达.表达蛋白经SDS-PAG及Western-blot分析后,亲和层析法纯化蛋白.结果成功克隆了HBX基因,并对其在E.coli中进行了表达.SDS-PAGE及Western blot分析表明表达产物正确.通过IMAC纯化系统获得17 kD纯化蛋白,与文献报道相符.结果成功获得了纯化的HBX蛋白,为进一步研究HBX蛋白与宿主蛋白之间的相互作用奠定基础.
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