【摘 要】
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目的克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础.方法根据乙型脑炎病毒株SA14-14-2E基因的序列设计一对引物,采用RT
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目的克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础.方法根据乙型脑炎病毒株SA14-14-2E基因的序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增其E基因全长cDNA,将扩增产物克隆到pBlusecriptIISK(+)载体中,然后亚克隆到原核表达载体PGEX-KG中,筛选重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白.结果与结论获得了含全长乙型脑炎病毒E基因的重组质粒,经酶切和测序证实构建正确.表达的目的蛋白经SDS-PAGE和Western blot
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