【摘 要】
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目的获得自然杀伤（NK）细胞缺陷的小鼠动物模型,并研究溶酶体运输调节因子（Lyst）基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠的Lyst基因：针对小鼠Lyst基因编码区第50个外
【机 构】
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塔里木大学生命科学学院,山东省日照市莒县畜牧兽医局,军事医学研究院实验动物中心,塔里木大学动物科学学院
【基金项目】
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军队实验动物专项[SYDW（2014）006]
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目的获得自然杀伤（NK）细胞缺陷的小鼠动物模型,并研究溶酶体运输调节因子（Lyst）基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠的Lyst基因：针对小鼠Lyst基因编码区第50个外显子,设计CRISPR/Cas9靶点引物（sgRNA）,并重组构建pUC57-Lyst-sg RNA载体。将重组质粒体与Cas9质粒分别利用T7 RNA聚合酶体外转录为mRNA,并按比例显微注射入小鼠受精卵,将受精卵移植到受体动物。获得子代小鼠后,利用PCR扩增和测序方法筛选Lyst基因发生改变的动物个体
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