【摘 要】
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目的:构建血管生成抑制因子arresten基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达.方法: 利用聚合酶链式反应(PCR),由我们构建的重组质粒pGEM-Arr中扩增出arresten基因; 采用
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科
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目的:构建血管生成抑制因子arresten基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达.方法: 利用聚合酶链式反应(PCR),由我们构建的重组质粒pGEM-Arr中扩增出arresten基因; 采用基因重组技术,将该基因定向克隆于原核表达载体pRSET中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对表达产物行SDS-PAGE分析.结果:酶切鉴定和DNA测序证实arresten基因正确地插入表达载体中.重组arresten在大肠杆菌中获得高效表达,其分子量约为26 kD,表达量约占菌体总蛋白量的3
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