H9N2亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的克隆及表达

来源 :畜牧与兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dama5011

【摘要】

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根据已知H9N2亚型禽流感病毒神经氨酸酶（NA）基因序列设计，合成克隆引物。自H9N2亚型病毒感染的鸡胚尿囊液中提取总RNA，反转录后采用高可信度DNA聚合酶（Pyobest^TM DNA Polymerase）

【作者】

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宋建领张富强王金萍胡嫒媛

【机构】

：

云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室

【出处】

：

畜牧与兽医

【发表日期】

：

2006年9期

【关键词】

：

禽流感病毒 H9N2亚型神经氨酸酶表达 avian influenza virus H9N2 subtype neuraminidase expres

【基金项目】

：

云南省科技攻关项目（2004NG-01）,农业部948项目（2004-Z41）.

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根据已知H9N2亚型禽流感病毒神经氨酸酶（NA）基因序列设计，合成克隆引物。自H9N2亚型病毒感染的鸡胚尿囊液中提取总RNA，反转录后采用高可信度DNA聚合酶（Pyobest^TM DNA Polymerase）扩增NA基因，采用Invitrogen定向表达系统（Champion^TM pET directional TOPO expression system）进行克隆表达，纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组NA，分子量约54．7ku。经免疫印迹及ELISA分析重组NA的免疫反应性和免疫动物分析其免

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