人抑癌基因FHIT真核表达质粒的构建与鉴定

来源 :肿瘤学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dgp000

【摘要】

：

[目的]构建人抑癌基因FHIT真核细胞表达载体。[方法]采用PCR方法，从人胎脑组织的总cDNA中扩增出444bp的人FHIT cDNA片段，然后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3．1／myc-His（-）B中，用

【作者】

：

夏养华沈建康

【机构】

：

上海交通大学医学院附属瑞金医院

【出处】

：

肿瘤学杂志

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

基因肿瘤抑制 FHIT基因遗传载体 gene tumor suppressor gene FHIT genetic vectors

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[目的]构建人抑癌基因FHIT真核细胞表达载体。[方法]采用PCR方法，从人胎脑组织的总cDNA中扩增出444bp的人FHIT cDNA片段，然后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3．1／myc-His（-）B中，用限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒；用该表达质粒转染COS-7细胞，Western blot法检测FHIT蛋白的表达情况。[结果]人FHIT基因cDNA以正确方向插入到真核细胞表达载体DcDNA3．1／myc-His（-）B中；转染COS-7细胞后

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