猪水泡病病毒RT-PCR检测方法的建立

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根据基因库中的猪水泡病病毒(SVDV)高度保守的VP1基因的序列,设计了与SVDV互补的2对特异性引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地扩增出251bp和366bp特异性条带.将其克隆入pMD18.T载体中,并进行序列测定,与已发表的SVDV基因比较发现。核苷酸的同源性为100%.证实为SVDV的VP1段基因。通过检测FMDV、VSV、BHK21细胞等,对照的扩增结果均为阴性.验证其特异。对SVDVRNA进行10倍系列稀释后检测.结果SVDVRNA在10^-4稀释度时仍能检测到阳性,说明具有较好的敏
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