【摘 要】
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目的 探讨神经营养因子(neuritin)在大鼠脑损伤(TBI)中的神经保护作用及对内质网应激相关因子-葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/增强子结合同源蛋白(CHOP)通路的影响.方法 将45只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(TBI组)、脑损伤+神经营养因子组(TBI+neuritin组),每组15只.除Sham组外,其余各组均采用改良Feeney自由落体法建立大鼠TBI模型;TBI+neuritin组在模型建立20 min内经侧脑室注射100 μL neuritin,sham组和TBI组经侧
【机 构】
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平煤神马医疗集团总医院神经内科,河南平顶山467000
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目的 探讨神经营养因子(neuritin)在大鼠脑损伤(TBI)中的神经保护作用及对内质网应激相关因子-葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/增强子结合同源蛋白(CHOP)通路的影响.方法 将45只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(TBI组)、脑损伤+神经营养因子组(TBI+neuritin组),每组15只.除Sham组外,其余各组均采用改良Feeney自由落体法建立大鼠TBI模型;TBI+neuritin组在模型建立20 min内经侧脑室注射100 μL neuritin,sham组和TBI组经侧脑室注射100 μL生理盐水.各组大鼠于手术3 d后,用苏木精-伊红(HE)进行模型鉴定;用改良神经功能损伤评分(mNSS)法评估神经功能受损程度;用伊文思蓝染色法检测血脑屏障破坏程度;用免疫组化染色检测脑皮层组织GRP78、CHOP、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)表达;原位末端标记法(TUNEL)检测脑皮层组织神经元细胞凋亡率,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测脑皮层组织GRP78、CHOP、caspase-12、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达.结果 与Sham组比较,TBI组及TBI+neuritin组mNSS评分、伊文思蓝渗出、GRP78染色表达、神经细胞凋亡、促凋亡蛋白cleaved caspase3、Bax、内质网应激相关分子GRP78、CHOP及caspase-12阳性表达及蛋白表达均升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与TBI组比较,TBI+neuritin组mNSS评分改善,伊文思蓝渗出、GRP78染色表达、神经细胞凋亡、促凋亡蛋白cleaved caspase3、Bax、内质网应激相关分子GRP78、CHOP及caspase-12阳性表达及蛋白表达均减少,抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Neuritin可降低CHOP、GRP78、caspase-12表达,抑制内质网应激反应,减轻血脑屏障破坏程度,降低脑皮层组织中神经元细胞凋亡,对TBI模型大鼠有神经保护作用.
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