OverlapPCR克隆黄牛脂肪特异性磷脂酶A2基因（AdPLA）及其原核表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xl122700059

【摘要】

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脂肪特异性磷脂酶A2基因（adipose-specific phospholipase A2,AdPLA）在脂肪组织甘油三酯水解过程中发挥着重要的调节作用,为了构建黄牛AdPLA基因原核表达系统,本研究通过Overla

【作者】

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朱金龙孙晓梅张亚蓝贤勇雷初朝陈宏

【机构】

：

西北农林科技大学动物科技学院

【出处】

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农业生物技术学报

【发表日期】

：

2011年6期

【关键词】

：

黄牛脂肪特异性磷脂酶A2基因(AdPLA) 原核表达 OverlapPCR Cattle Adipose-specific phospholipase A2

【基金项目】

：

国家自然科学基金（No.30972080）, 国家支撑计划（No.2008ADB2B03-19）, 国家高技术研究发展计划（863）（No.2008AA101010）, 国家转基因重大专项（No.2009ZX08009-157B 2008ZX08007-002 2009ZX08007-005B-07）, 农业部现代肉牛产业技术体系专项（No.Nycytx-38）共同资助

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脂肪特异性磷脂酶A2基因（adipose-specific phospholipase A2,AdPLA）在脂肪组织甘油三酯水解过程中发挥着重要的调节作用,为了构建黄牛AdPLA基因原核表达系统,本研究通过Overlap PCR方法从黄牛（Bos taurus）基因组DNA中得到了AdPLA基因编码区全长,将其克隆到pGM-T载体上,阳性克隆经测序表明,与NCBI公布的序列（GenBank No.NM_001075280）完全一致。阳性质粒经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,将其定向重组到pET28a（＋）

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