【摘 要】
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目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株，并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中，经G418筛选单克隆阳性细胞，采用Westernblot
【机 构】
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中南大学药学院,军事医学科学院毒物药物研究所
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目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株，并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中，经G418筛选单克隆阳性细胞，采用Westernblot技术、RT—PCR法、免疫荧光法证实稳定表达CRFR1细胞株构建成功。并用CRF刺激稳定表达CRFR1的HEK293细胞株，绘制CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的量效曲线。结果West—elTlblot、RT．PCR、免疫荧光结果表明，CRFR1受体在HEK293细胞
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