论文部分内容阅读
目的建立DSS诱导大鼠急性炎症性肠病(IBD)模型,研究维生素D和维生素E对急性IBD的治疗作用及探讨其作用机制。方法①将雄性Wistar大鼠分为如下7组,正常对照,DSS模型对照,泼尼松龙(1mg·kg-1.d-1)阳性对照,维生素D(50ng.d-1),维生素E(2g·kg-1.d-1),维生素D(50ng.d-1)+E(2 g·kg-1.d-1)联合,以及泼尼松龙(1mg·kg-1.d-1)+维生素D(50 ng.d-1)+维生素E(2g·kg-1.d-1)三联给药。急性诱导期,除正常对照组外,各组均给予5%DSS自由饮用,用以建立急性IBD模型。②建模成功后,即进入恢复期,各组恢复正常饮水,除正常对照组和DSS模型对照组灌胃给予生理盐水外,其余各组按组别分别给予泼尼松龙、维生素D、维生素D+E、三联治疗药灌胃给药,观察治疗恢复效果。③临床观察及实验指标:记录大鼠每日摄食摄水量,体重及临床观察评分;诱导期、恢复期结束后,分别对正常对照组、DSS模型对照组半数大鼠以及剩余大鼠进行活检;应用流式细胞仪检测血浆CD3+,CD4/CD8,全生化分析仪检测血浆中各生化指标;Elisa检测结肠及肠系膜淋巴结中细胞因子IL-1β,IL-18,IL-6,IL-12,TNF-α,IFN-γ含量;取结肠、直肠、肝脏等组织测定脏器系数及制备病理组织切片。结果与正常对照组相比,急性诱导期,DSS模型对照组大鼠出现明显的溏便及血便,临床观察评分显著升高(P<0.05),且胸腺皮质、脾白髓及肠系膜淋巴结发生不同程度萎缩,肝、脾、结肠可见明显的膨大肿胀,淋巴细胞坏死;病理组织切片可见,结肠部位明显溃疡,并伴有黏膜脱落;血浆中红细胞及红细胞比容显著降低,中性粒细胞略为增加,白细胞水平、CD4/CD8比值升高(P<0.05);结肠及肠系膜淋巴结中促炎因子IL-1β,IL-18,IL-6,IL-12,TNF-α,IFN-γ含量显著升高,说明免疫细胞异常活化,DSS诱导的大鼠急性IBD模型成功建立。恢复期,DSS模型对照组自行恢复效果不明显,各给药组结肠中IL-12,IL-18,TNF-α显著降低,且表现出不同程度的治疗作用。其中维生素D组血浆中CD4/CD8显著降低;维生素E组CD3+水平降低;三联给药组溏便及便血得到缓解,结肠溃疡恢复效果最为显著。提示维生素D和维生素E可与泼尼松龙联合治疗急性IBD。结论综合临床观察评分、血液生化分析、组织切片观察、细胞因子检测等指标进行分析,急性IBD模型建立成功,各治疗组恢复效果较DSS模型对照组显著,以三联给药组恢复效果为最佳。维生素D和维生素E可能是通过调节大鼠结肠IL-12,IL-18,TNF-α分泌来缓解DSS诱导的大鼠急性IBD。