人内皮型一氧化氮合酶cDNA在COS-7细胞中的表达

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本研究从人脐静脉血管内皮细胞中提取总RNA,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,扩增出人内皮型一氧化氮合酶(heNOS)cDNA,总长度为3731bp.将其克隆入pUCm-T载体质粒,序列分析表明,克隆所得片段含有完整开放阅读框架,与GenBank中heNOS cDNA序列同源性达99.93%,在此基础上发现有若干核酸多态性.将该基因片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,用脂质体转染法将pcDNA3.0/heNOS转染到COS-7细胞株,RT-PCR、Western blot分别检测到外源性eNO
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