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目的:研究冬虫夏草(Cordyceps sinensis,CS)对缺血-再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)的HK2细胞凋亡水平和Sirt1表达的影响,探讨CS对HK2细胞IRI的保护机制.方法:不同浓度CS(10,20,40,80,160,320 mg/L)与HK2细胞共培养24 h,测定细胞增殖率,确定其最佳干预浓度;体外培养的HK2细胞用0.01μmol/L抗霉素A处理模拟缺血过程,2h后恢复含血清培养基模拟再灌注过程.将HK2细胞分为对照组,I/R组,I/R+CS组(160 mg/L),I/R+CS(160 mg/L)+sirtinol(25 μmol/L)组,24 h后提取各组细胞总RNA和蛋白.四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;qRT-PCR及Western印迹检测Sirt1和凋亡相关基因(cleaved caspase-3)mRNA及蛋白表达的变化,AnnexinV-FITC/PI双染法及流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:CS 10～160 mg/L与HK2细胞作用24 h,对细胞增殖影响不明显(P＞0.05);当浓度增大到320 mg/L时,出现明显抑制HK2细胞增殖的现象(P＜0.01).与对照组相比,I/R且Sirt1,cleaved caspase-3 mRNA和蛋白表达增加(P＜0.01),细胞凋亡率明显增加(P＜0.01);相对于I/R组,I/R+CS组Sirt1mRNA和蛋白水平增加(P＜0.01),而cleaved caspase-3 mRNA和蛋白表达明显下降(P＜0.01),细胞凋亡率降低(P＜0.05).给予Sirt1抑制剂sirtinol后,I/R+CS+sirtinol(25 μmol/L)组Sirt1 mRNA和蛋白明显降低(P＜0.05),cleaved caspase-3 mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.05),细胞凋亡率较I/R+CS组增加(P＜0.05).结论:CS对HK2细胞IRI具有保护作用,其机制可能与CS促进Sirt1表达有关.