【摘 要】
：
目的 观察沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达后,对缺氧微环境下人胰腺癌BxPC-3细胞株生长、侵袭和凋亡功能的影响.方法 通过合成短链干扰RNA(siRNA)转染沉默BxPC-3细胞株中HIF-1α基因表达.将细胞分为空白对照组(BxPC-3)、空白质粒转染对照组(GFP)和HIF-1α基因沉默组(sh-HIF-1α),分别在正常环境(21.0％ O2)和缺氧环境(0.5％ ～1.0％ O2
【机 构】
：
200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海
论文部分内容阅读
目的 观察沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达后,对缺氧微环境下人胰腺癌BxPC-3细胞株生长、侵袭和凋亡功能的影响.方法 通过合成短链干扰RNA(siRNA)转染沉默BxPC-3细胞株中HIF-1α基因表达.将细胞分为空白对照组(BxPC-3)、空白质粒转染对照组(GFP)和HIF-1α基因沉默组(sh-HIF-1α),分别在正常环境(21.0％ O2)和缺氧环境(0.5％ ～1.0％ O2)中培养48 h后,描绘各组细胞的生长曲线,并对细胞侵袭性和凋亡率进行检测比较.结果 缺氧培养后BxPC-3组和GFP组细胞中HIF-1αmRNA表达分别比正常环境中增加了78.4％和67.6％,相应的HIF-1α蛋白表达分别增加了7.1倍和6.2倍,明显高于sh-HIF-1α组(P＜0.05).在缺氧环境下,sh-HIF-1 α组细胞生长速度慢于BxPC-3组和GFP组(P＜0.05),其穿膜细胞数[(48.8±3.8)个/HP]也明显低于BxPC-3组[(118.0±6.8)个/HP]和GFP组[(116.3±6.4)个/HP,P＜0.01].相反sh-HIF-1 α组细胞在缺氧环境中的凋亡率(20.6±1.3)％明显高于BxPC-3组(2.3±0.3)％和GFP组(2.8±0.9)％(P＜0.01).结论 缺氧可以诱导HIF-1α高表达并提高BxPC-3细胞对缺氧应激的耐受能力,沉默HIF-1α基因表达后,BxPC-3细胞株对缺氧的耐受性显著下降,在缺氧环境中细胞的生长、侵袭能力降低,而缺氧诱导的细胞凋亡明显增加。
其他文献
目的 探讨体外联合HaCaT细胞共同培养诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向表皮细胞分化的可行性.方法 用聚碳酸酯细胞插入板分层后联合共同培养HaCaT细胞与MSCs,观察培养3、6、9d后的细胞形态,进行角蛋白(CK-19、CK-10)、整合素(α6、β1)染色并用流式细胞仪统计细胞阳性率.结果 共同培养后细胞形态变化明显,共培养3、6d后表皮细胞标志物CK-19、α6整合素、β1整合素免疫荧光染
目的 观察内皮素-1(ET-1)受体拮抗剂BQ-123对兔急性肺栓塞溶栓后肺缺血-再灌注损伤的保护作用.方法 日本大耳白兔24只,雌雄不限,体质量(3.0±0.5) kg,随机分成4组(每组6只)即:假手术组(SHAM组)、栓塞组(PE组)、尿激酶组(UK组)、尿激酶+BQ-123组(UK+BQ组).各组分别于栓塞前、栓塞后0.5、2、4h监测记录肺动脉平均压并采静脉血检测血浆ET-1浓度,实验结
自体骨髓干细胞(BMSCs)是组织工程中重要的种子细胞.种子细胞与支架材料的黏附是细胞种植的关键,目前尚无大规模临床实验应用骨髓干细胞及不同支架材料移植治疗骨不连.我院子2006年6月至2011年3月以经体外成骨诱导的自体骨髓干细胞为种子细胞,联合不同支架材料移植治疗骨不连,观察骨髓干细胞及不同支架材料移植的治疗效果。
目的 观察乙酰肝素酶(Hpa)在乳腺癌的表达,探讨它们的表达与乳腺癌浸润、转移的关系及临床意义.方法 对60例未行任何化疗、放疗和内分泌治疗的原发性乳腺癌病理标本进行分析,应用苏木素-伊红(HE)染色观察乳腺癌的组织形态和病理学变化；应用免疫组织化学法检测乳腺癌患者癌组织、癌旁2 cm乳腺组织及距癌组织5 cm以上的正常乳腺组织中Hpa的表达.结果 60例乳腺癌病理标本免疫组织化学结果显示,乳腺癌
目的 探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、SFN基因启动子区甲基化异常与皮肤鳞癌发生的关系及临床意义.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测40例皮肤鳞癌和20例正常皮肤组织中MGMT、SFN两组基因甲基化状态及mRNA的表达.结果 鳞癌组织中的MGMT、SFN基因启动子附近甲基化频率分别为42.5％、35.0％,明显高于正常皮肤
目前常用的插管方法有:颈部切口插管法[1]、颈部切口钢丝引导插管法、盲插法、内窥镜辅助插管法、经口明视插管法[2]等.我们采用经额镜辅助和经颈透照两种直视气管插管方法,为大鼠进行插管操作,现报道如下。
目的 观察ALDH1A2基因过表达对LoVo细胞增殖、侵袭及黏附能力的影响.方法 将携带有人外源性ALDH1A2基因的真核表达质粒转染人结肠癌细胞株LoVo细胞,分别应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法从mRNA及蛋白水平测定3组细胞中ALDH1A2水平变化,通过噻唑蓝(MTT)、Matrigel体外侵袭实验、平板克隆形成实验、黏附实验测定不同组别细胞增殖能力、侵袭
小肝癌(病理证实原发性肝癌,肿瘤直径≤5 cm).手术切除仍然是首选临床治疗手段.我院2002至2010年共收治75例符合小肝癌诊断标准,对75例小肝癌均实施手术切除,现报道如下。
目的 探讨β1,6N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V(MGAT5)与胃癌分化程度的相关性.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测胃癌细胞株中MGAT5的表达.收集2001年1月至2008年12月在复旦大学中山医院行胃癌根治术的213例胃腺癌与97例癌旁病理组织标本,免疫组织化学染色检测MGAT5的表达,并分析其与胃癌分化程度的相关性.结果 随着分化程度的下降,胃癌细胞株
21世纪,研究组织工程学来构成组织或器官是热点和趋势之一.组织工程学是希望人为地通过组织再生过程来获得可以代替病变的组织或器官.长期以来,组织工程学多从种子细胞、支架材料以及两者之间的相互作用着手,对生物组织的构建去进行研究。