论文部分内容阅读
[摘要]目的探讨裕泽毅公司血栓弹力图仪（YZ）与美国血技公司血栓弹力图仪（TEG）检测血小板功能的相关性以及抗血小板药物抑制率检测效果。方法抽取20例患者的静脉血，分别留取枸橼酸和肝素抗凝血样各2管，分别用YZ和乐普公司血小板检测仪及试剂与TEG血小板检测试剂进行血小板功能平行测定，观察其相关性。结果两种方法检测同一血样测得的凝血因子激活时间（R）分别为：YZ法（822±274）min，TEG法（805±297）min，P>005；最大血块强度（MA）分别为：YZ法（6600±766）mm；TEG法（6568±762）mm，P>005。通过秩和检验分析，两种方法检测AA抑制率：YZ法（7297±2478）%；TEG法（7255±2716）%，P>005；ADP抑制率：YZ法（5885±2899）%；TEG法（5843±2937）%，P>005。两种方法检测AA抑制率>50%的患者比例均为80%，ADP抑制率>50%的患者比例均为65%，通过秩和检验分析P>005。结论使用裕泽毅血栓弹力图仪与TEG血栓弹力图仪及试剂检测血小板功能及抗血小板药物抑制率效果良好，结果具有相关性，能为临床医生提供可靠、准确、有价值的诊断指导依据。
[关键词]血栓弹力图；血小板；相关性
中图分类号：R109文献标识码：A文章编号：1009_816X（2015）04_0278_03
doi：103969/jissn1009_816x20150404A Comparative Study of Platelet Test of Thromboelastography TEG. CHEN Mu_lei， YANG Xin_chun， LIU Jia_mei， et al. Heart Center， Beijing Chaoyang Hospital， Beijing 100020， China
[Abstract] Objective To compare the platelet functions and inhibition ratios of antiplatelet drug by YZ 5000 thromboelastography and TEG machines.Methods Venous blood of 20 patients were drew， citrated acid and heparinization venous blood samples were analyzed randomly by machines and reagents of YZ 5000 and TEG. Then the deviation and correlation of the different machines and reagents were evaluated. Results Clotting time（R） fortwo different methods were： （YZ） 822±274min， （TEG） 805±297min （r2=091， P>005）； Maximum amplitude（MA） value for two methods were （YZ） 6600±766mm； （TEG） 6568±762mm， （r2=093， P>005）.Arachidonic acid（AA）inhibition ratios for two methods were （YZ） 7297%±2478%； （TEG） 7255%±2716%（r2=097，P=062）； ADP inhibition ratio from two methods are （YZ） 5885%±2899%； （TEG） 5843%±2937%（r2=097，P=063）. The ratio of AA inhibition ratio that more than 50% oftwo methods are all 80%.The ratios of ADP inhibitionoftwo methods， which more than 50%，were both 65% （P>0.05）. Conclusions The test ofplatelet functions and inhibition ratios of antiplatelet drug by YZ 5000 thromboelastography and TEG machines proved having good effect. The result is relevant， whichcan provide reliable， accurate and valuable diagnostic basis for clinic treatment.
[Key words] Thrombelastogram； Platelet； Relativity
目前临床上常用的血小板功能的检测有血小板聚集性测定（比浊法），流式细胞仪和血栓弹力图血小板功能检测[1]。血栓弹力图检测可以分析凝血动态过程，提示凝血因子、血小板聚集、纤维蛋白交叉连接以及血凝块溶解的全过程，快速、准确的判断患者血液凝固情况[2，3]。其中的血小板功能检测能评估正在接受抗血小板治疗患者中血小板抑制程度。与传统的血小板功能检测相比，血栓弹力图可以确定血小板-纤维蛋白凝块的最大强度与患者凝血系统的关系，检测血液凝固过程的各种物理属性，协助评估出血和血栓风险，并指导阿司匹林和氯吡格雷用量和治疗方案的调整[4]，有效的降低临床事件的发生[5]。本研究通过对比裕泽毅血栓弹力图仪与美国TEG血栓弹力图仪检测同一血样普通检测和血小板检测的结果，明确国产和进口机器对于同一血样的检测结果是否一致。为临床使用和调整抗血小板药物剂量提供更好的指导。 1资料与方法
11一般资料：选取2014年6月入住我院心内科的患者20例，主要疾病为急性心肌梗死或不稳定心绞痛，年龄52～80岁，连续服用7天以上抗血小板药物，阿司匹林剂量为100mg/天、波立维剂量为75mg/天。所有患者均告知本实验目的，签署知情同意书。
12方法：
121样本收集：患者同时抽取枸橼酸和肝素抗凝血样各2管。按采血管标定容量采血后立即将采血管颠倒3～5次以保证血样和抗凝剂充分混合。采集血样后2h内检测。
122检测方法：严格按照血栓弹力图血小板检测操作规程进行实验，由同一人操作。对每份血进行平行交叉检测。比较两个系统的凝血因子激活时间（R），最大血块强度（MA）、抑制率（%），进行统计分析。血小板花生四烯酸（AA）途径抑制率为阿司匹林抑制效果，二磷酸腺苷（ADP）受体途径抑制率为氯吡格雷抑制效果。
血栓弹力图血小板检测利用AA或ADP单独诱导下得到的血小板强度MA值和普通检测血小板完全激活下的MA以及纤维蛋白原激活下血小板强度计算相关药物抑制率。计算公式为Inhibition=1-（MAP-MAF）/（MAT-MAF）。MAP：AA或ADP激活的血小板强度，MAF：纤维蛋白的MA值，MAT：最大血小板强度。该检测中抑制率≥50%表示对药物敏感，<50%表示对药物不敏感。当抑制率≥80%时，认为血小板得到很好的抑制效果[6]。
仪器分别用裕泽毅公司（YZ）血栓弹力图仪以下称国产和TEG血栓弹力图仪以下称进口。试剂为北京乐普公司血小板检测试剂以下称国产和TEG血小板检测试剂称进口。
13统计学处理：采用SPSS version 21软件进行统计分析，计量资料以（x-±s）表示，R值、MA值及AA和ADP抑制率进行秩和检验及相关性分析，以P<005为差异有统计学意义。
2结果
21患者血栓弹力图普通检测结果：YZ系统R值（82±27）min，TEG系统R值（81±29）min，P>005，差异无统计学意义；r2=091，两组数据相关性良好。YZ系统MA值（660±77）mm，TEG系统MA值（657±76）mm，P>005，差异无统计学意义；r2=093，两组数据相关性良好，见表1。
讨论
阿司匹林和氯吡格雷已经成为临床冠心病和缺血性脑卒中预防的一线抗血小板药物，对冠心病和缺血性脑卒中的预防和治疗至关重要[7，8]。但是，在采用统一的抗血小板治疗的同时，也不能忽略血小板反应的多样性。低反应性患者发生血栓事件的风险会显著增高，只有通过个体化调整具体用药的类型和剂量，才能降低缺血性脑卒中患者血栓形成风险和出血不良反应[9]。抑制血小板的聚集可以通过抑制环氧化酶减少TXA2生成途径，也可以通过抑制ADP受体途径。血栓弹力图AA途径诱导和ADP途径诱导的血小板聚集率就是利用以上的原理[6]。
本实验的平行对照研究表明，不管血小板活性处于何种水平，血栓弹力图可以敏感的检测到血小板数量和聚集能力的综合表现结果，提供每位患者个性化的阿司匹林和/或氯吡格雷的抑制率。目前血栓弹力图技术是唯一可以计算血小板抑制率的检测方法[10]。本研究提示，在目前冠心病患者常规服用阿司匹林100mg/天、波立维75mg/天的剂量下，80%患者AA抑制率>50%，65%患者ADP抑制率>50%，说明绝大多数患者血小板功能得到一定程度的抑制。但是，不同的患者对于药物敏感性差异比较大，特别是对于氯吡格雷。本研究中只有25%的患者ADP抑制率超过80%。阿司匹林的治疗反应稍好，45%的患者AA抑制率超过80%，说明临床上血小板功能得到良好抑制的患者只占少数。采用进口TEG系统和国产系统在评估AA和ADP途径的血小板抑制率方面均有高度的一致性，根据检测结果，将患者对药物的敏感性分类，在后续治疗过程中，可以有针对性地检测患者凝血状况，调节药物剂量，减少再次缺血事件的发生。通过更多样本的收集和抑制率的统计，将可以在目前提供统一维持剂量的基础上，提出更好的个性化给药方案，更好地为临床服务。
参考文献
[1]Conolly S， Pogue J， Hart R， et al. Clopdogrel plus aspirin versus oral anticoagulation for atrial fibrillation in the atrial fibrillation clopidogrel trial with irbesartan for prevention of vascular events[J]. Arandomised controlled trial Lancet， 2006，367（9526）：1903-1912.
[2]中华医学会神经学分会脑血管病学组缺血性脑卒中二级预防指南撰写组.中国缺血性脑卒中和短暂性脑缺血发作二级预防指南2010[J].中华神经科杂志，2010，43（2）：154-160.
[3]Paraskevas KI， Mikailidis DP， Veith FJ. Letter by paraskevas et al regarding article， Guidelines for the prevention of stroke in patients with stroke or transient ischemic attack： a guideline for healthcare professionals from the American heart association[J]. Stroke，2011，42（6）：387.
[4]Evans DJ， Jackman LE， Chamberlain， et al. Platelet P2Y（12） receptor influences the vessel wall response to arterial injury and thrombosis[J]. Circulation，2009，119（1）：116-122. [5]Bliden KP， DiChiara J， Tantry US， et al. Increased risk in patients with high platelet aggregation receiving chronic clopidogrel therapy undergoing percutaneous coronary intervention： is the current antiplatelet therapy adequate[J]？ Am coll cardiol，2007，49：657-666.
[6]任艺虹，盖鲁粤，杨庭树，等.改良血栓弹力图法和流式细胞测定技术对血小板活性抑制程度的比较[J]，中华心血管病杂志，2007，35（4）：366-367.
[7]Girdauskas E， Kempfert J， Kuntze T， et al. Thromboelastometrically guilded transfusion protocol during aortic surgery with circulatory arrest： a prospective randomized trial[J]. Thorac cardiovasc surg，2010，140（5）：1117-1124.
[8]李潇颖，王培昌，武剑.血小板功能检测在缺血性卒中防治中的作用[J].国际脑血管病杂志，2014，22（6）：445-449.
[9]Furie KL， Kasner SE， Adams RJ， et al. American Heart Association Stroke Council. Guildelines for the prevention of stroke for healthcare professionals from the American heart association/American stroke association[J]. Stroke，2011，42：227-276.
[10]Dichiara J， Bliden KP， Tantry US， et al. Platelet function measured by Verifynow identified generalized high platelet reactivity in aspirin treated patients[J]. Platelet，2007，18：414-423.
（收稿日期：2015_3_30）
[关键词]血栓弹力图；血小板；相关性
中图分类号：R109文献标识码：A文章编号：1009_816X（2015）04_0278_03
doi：103969/jissn1009_816x20150404A Comparative Study of Platelet Test of Thromboelastography TEG. CHEN Mu_lei， YANG Xin_chun， LIU Jia_mei， et al. Heart Center， Beijing Chaoyang Hospital， Beijing 100020， China
[Abstract] Objective To compare the platelet functions and inhibition ratios of antiplatelet drug by YZ 5000 thromboelastography and TEG machines.Methods Venous blood of 20 patients were drew， citrated acid and heparinization venous blood samples were analyzed randomly by machines and reagents of YZ 5000 and TEG. Then the deviation and correlation of the different machines and reagents were evaluated. Results Clotting time（R） fortwo different methods were： （YZ） 822±274min， （TEG） 805±297min （r2=091， P>005）； Maximum amplitude（MA） value for two methods were （YZ） 6600±766mm； （TEG） 6568±762mm， （r2=093， P>005）.Arachidonic acid（AA）inhibition ratios for two methods were （YZ） 7297%±2478%； （TEG） 7255%±2716%（r2=097，P=062）； ADP inhibition ratio from two methods are （YZ） 5885%±2899%； （TEG） 5843%±2937%（r2=097，P=063）. The ratio of AA inhibition ratio that more than 50% oftwo methods are all 80%.The ratios of ADP inhibitionoftwo methods， which more than 50%，were both 65% （P>0.05）. Conclusions The test ofplatelet functions and inhibition ratios of antiplatelet drug by YZ 5000 thromboelastography and TEG machines proved having good effect. The result is relevant， whichcan provide reliable， accurate and valuable diagnostic basis for clinic treatment.
[Key words] Thrombelastogram； Platelet； Relativity
目前临床上常用的血小板功能的检测有血小板聚集性测定（比浊法），流式细胞仪和血栓弹力图血小板功能检测[1]。血栓弹力图检测可以分析凝血动态过程，提示凝血因子、血小板聚集、纤维蛋白交叉连接以及血凝块溶解的全过程，快速、准确的判断患者血液凝固情况[2，3]。其中的血小板功能检测能评估正在接受抗血小板治疗患者中血小板抑制程度。与传统的血小板功能检测相比，血栓弹力图可以确定血小板-纤维蛋白凝块的最大强度与患者凝血系统的关系，检测血液凝固过程的各种物理属性，协助评估出血和血栓风险，并指导阿司匹林和氯吡格雷用量和治疗方案的调整[4]，有效的降低临床事件的发生[5]。本研究通过对比裕泽毅血栓弹力图仪与美国TEG血栓弹力图仪检测同一血样普通检测和血小板检测的结果，明确国产和进口机器对于同一血样的检测结果是否一致。为临床使用和调整抗血小板药物剂量提供更好的指导。 1资料与方法
11一般资料：选取2014年6月入住我院心内科的患者20例，主要疾病为急性心肌梗死或不稳定心绞痛，年龄52～80岁，连续服用7天以上抗血小板药物，阿司匹林剂量为100mg/天、波立维剂量为75mg/天。所有患者均告知本实验目的，签署知情同意书。
12方法：
121样本收集：患者同时抽取枸橼酸和肝素抗凝血样各2管。按采血管标定容量采血后立即将采血管颠倒3～5次以保证血样和抗凝剂充分混合。采集血样后2h内检测。
122检测方法：严格按照血栓弹力图血小板检测操作规程进行实验，由同一人操作。对每份血进行平行交叉检测。比较两个系统的凝血因子激活时间（R），最大血块强度（MA）、抑制率（%），进行统计分析。血小板花生四烯酸（AA）途径抑制率为阿司匹林抑制效果，二磷酸腺苷（ADP）受体途径抑制率为氯吡格雷抑制效果。
血栓弹力图血小板检测利用AA或ADP单独诱导下得到的血小板强度MA值和普通检测血小板完全激活下的MA以及纤维蛋白原激活下血小板强度计算相关药物抑制率。计算公式为Inhibition=1-（MAP-MAF）/（MAT-MAF）。MAP：AA或ADP激活的血小板强度，MAF：纤维蛋白的MA值，MAT：最大血小板强度。该检测中抑制率≥50%表示对药物敏感，<50%表示对药物不敏感。当抑制率≥80%时，认为血小板得到很好的抑制效果[6]。
仪器分别用裕泽毅公司（YZ）血栓弹力图仪以下称国产和TEG血栓弹力图仪以下称进口。试剂为北京乐普公司血小板检测试剂以下称国产和TEG血小板检测试剂称进口。
13统计学处理：采用SPSS version 21软件进行统计分析，计量资料以（x-±s）表示，R值、MA值及AA和ADP抑制率进行秩和检验及相关性分析，以P<005为差异有统计学意义。
2结果
21患者血栓弹力图普通检测结果：YZ系统R值（82±27）min，TEG系统R值（81±29）min，P>005，差异无统计学意义；r2=091，两组数据相关性良好。YZ系统MA值（660±77）mm，TEG系统MA值（657±76）mm，P>005，差异无统计学意义；r2=093，两组数据相关性良好，见表1。
讨论
阿司匹林和氯吡格雷已经成为临床冠心病和缺血性脑卒中预防的一线抗血小板药物，对冠心病和缺血性脑卒中的预防和治疗至关重要[7，8]。但是，在采用统一的抗血小板治疗的同时，也不能忽略血小板反应的多样性。低反应性患者发生血栓事件的风险会显著增高，只有通过个体化调整具体用药的类型和剂量，才能降低缺血性脑卒中患者血栓形成风险和出血不良反应[9]。抑制血小板的聚集可以通过抑制环氧化酶减少TXA2生成途径，也可以通过抑制ADP受体途径。血栓弹力图AA途径诱导和ADP途径诱导的血小板聚集率就是利用以上的原理[6]。
本实验的平行对照研究表明，不管血小板活性处于何种水平，血栓弹力图可以敏感的检测到血小板数量和聚集能力的综合表现结果，提供每位患者个性化的阿司匹林和/或氯吡格雷的抑制率。目前血栓弹力图技术是唯一可以计算血小板抑制率的检测方法[10]。本研究提示，在目前冠心病患者常规服用阿司匹林100mg/天、波立维75mg/天的剂量下，80%患者AA抑制率>50%，65%患者ADP抑制率>50%，说明绝大多数患者血小板功能得到一定程度的抑制。但是，不同的患者对于药物敏感性差异比较大，特别是对于氯吡格雷。本研究中只有25%的患者ADP抑制率超过80%。阿司匹林的治疗反应稍好，45%的患者AA抑制率超过80%，说明临床上血小板功能得到良好抑制的患者只占少数。采用进口TEG系统和国产系统在评估AA和ADP途径的血小板抑制率方面均有高度的一致性，根据检测结果，将患者对药物的敏感性分类，在后续治疗过程中，可以有针对性地检测患者凝血状况，调节药物剂量，减少再次缺血事件的发生。通过更多样本的收集和抑制率的统计，将可以在目前提供统一维持剂量的基础上，提出更好的个性化给药方案，更好地为临床服务。
参考文献
[1]Conolly S， Pogue J， Hart R， et al. Clopdogrel plus aspirin versus oral anticoagulation for atrial fibrillation in the atrial fibrillation clopidogrel trial with irbesartan for prevention of vascular events[J]. Arandomised controlled trial Lancet， 2006，367（9526）：1903-1912.
[2]中华医学会神经学分会脑血管病学组缺血性脑卒中二级预防指南撰写组.中国缺血性脑卒中和短暂性脑缺血发作二级预防指南2010[J].中华神经科杂志，2010，43（2）：154-160.
[3]Paraskevas KI， Mikailidis DP， Veith FJ. Letter by paraskevas et al regarding article， Guidelines for the prevention of stroke in patients with stroke or transient ischemic attack： a guideline for healthcare professionals from the American heart association[J]. Stroke，2011，42（6）：387.
[4]Evans DJ， Jackman LE， Chamberlain， et al. Platelet P2Y（12） receptor influences the vessel wall response to arterial injury and thrombosis[J]. Circulation，2009，119（1）：116-122. [5]Bliden KP， DiChiara J， Tantry US， et al. Increased risk in patients with high platelet aggregation receiving chronic clopidogrel therapy undergoing percutaneous coronary intervention： is the current antiplatelet therapy adequate[J]？ Am coll cardiol，2007，49：657-666.
[6]任艺虹，盖鲁粤，杨庭树，等.改良血栓弹力图法和流式细胞测定技术对血小板活性抑制程度的比较[J]，中华心血管病杂志，2007，35（4）：366-367.
[7]Girdauskas E， Kempfert J， Kuntze T， et al. Thromboelastometrically guilded transfusion protocol during aortic surgery with circulatory arrest： a prospective randomized trial[J]. Thorac cardiovasc surg，2010，140（5）：1117-1124.
[8]李潇颖，王培昌，武剑.血小板功能检测在缺血性卒中防治中的作用[J].国际脑血管病杂志，2014，22（6）：445-449.
[9]Furie KL， Kasner SE， Adams RJ， et al. American Heart Association Stroke Council. Guildelines for the prevention of stroke for healthcare professionals from the American heart association/American stroke association[J]. Stroke，2011，42：227-276.
[10]Dichiara J， Bliden KP， Tantry US， et al. Platelet function measured by Verifynow identified generalized high platelet reactivity in aspirin treated patients[J]. Platelet，2007，18：414-423.
（收稿日期：2015_3_30）