观察吡非尼酮对甲状腺相关眼病（thyroid associated ophthalmopathy，TAO）患者眼眶成纤维细胞（orbital fibroblast，OF）功能的影响及相关机制。
方法体外培养TAO患者OF，不同浓度（0、250、500、1 000 μg/ml）吡非尼酮加入OF培养液中分别培养24、48、72 h，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测吡非尼酮对OF增殖的影响，台盼蓝染色法检测细胞存活状态。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGFβ1）的表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测吡非尼酮对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分泌的影响。
结果（1）TAO眼外肌来源成纤维细胞原代培养成功并稳定传代；（2）各吡非尼酮药物浓度组均可抑制OF的增殖，250、500、1 000 μg/ml吡非尼酮处理72 h后各组增殖率分别为-15.31%、-24.92%、-48.53%，与对照组（0）比较差异均有统计学意义（P值均<0.05），1 000 μg/ml浓度组抑制作用与其他两组差异有统计学意义（P<0.05），同一浓度组作用不同时间的抑制作用差异无统计学意义（P>0.05）。250、500、1 000 μg/ml吡非尼酮处理72 h后成纤维细胞的存活率分别为79.21%、78.24%、76.28%，对照组细胞存活率为78.37%，差异无统计学意义（P>0.05）。（3）RT-qPCR结果显示，250、500、1 000 μg/ml吡非尼酮处理后各浓度组TGFβ1的mRNA相对表达量分别为0.760±0.010、0.440±0.006、0.290±0.002，与对照组（0.950±0.014）相比差异均有统计学意义（P值均<0.05），吡非尼酮1 000 μg/ml组TGFβ1 mRNA表达水平明显低于其他两试验组（P<0.05）。各浓度组不同时间段比较差异无统计学意义（P>0.05）。ELISA结果显示，250、500、1 000 μg/ml吡非尼酮处理72 h后各浓度组Ⅰ型胶原蛋白分泌量分别为0.633±0.006，0.527±0.003，0.402±0.008，Ⅲ型胶原蛋白的分泌量分别为0.511±0.003，0.439±0.007，0.223±0.006，均低于对照组（0.794±0.005，0.527±0.007，P值均<0.05），吡非尼酮1 000 μg/ml组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的分泌量明显低于250、500 μg/ml组（P<0.05）。同浓度组不同时间段比较，Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的分泌量无明显变化，差异无统计学意义。
结论（1）组织块贴壁法可成功培养TAO眼外肌来源成纤维细胞；（2）吡非尼酮抑制体外培养的TAO患者OF的增殖、TGFβ1的表达及胶原蛋白的分泌，吡非尼酮的抗纤维化作用可能与其相关。