血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

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血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)属于小RNA 病毒科,主要引起雏鸭以肝脏肿胀、出血为主的急性、烈性传染病。DHAV-3有3个主要结构蛋白,其中VP0蛋白具有极佳的抗原性及宿主保护位点。为研制鸭肝炎病毒VP0蛋白的单克隆抗体,将鸭肝炎病毒的VP0基因进行原核表达,用纯化后的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、IFA筛选以及亚克隆后,获得了一株能够稳定分泌抗VP0蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞3A5,亚类鉴定为IgG1,IFA检测腹水效价为1;12800。Western blot、IFA结果表明制备的单克隆抗体效价高,反应原性强,为后续建研制血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒的快检试剂盒及建立病原及抗体检测方法奠定基础。
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