表达的siRNA对人乳腺癌SKBr-3细胞中survivin基因的干涉作用

来源 :中国肿瘤生物治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：helloclare

【摘要】

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目的:构建针对人survivin基因的siRNA真核表达载体,检测其对人乳腺癌SKBr-3细胞中survivin基因表达的干涉作用.方法:将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入经HindⅢ和BglⅡ

【作者】

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李庆霞刘家云黄红艳许彦鸣贾林涛赵晶王

【机构】

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第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学免疫学教研室,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室

【出处】

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中国肿瘤生物治疗杂志

【发表日期】

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2004年4期

【关键词】

：

survivin RNA干涉真核表达载体乳腺癌细胞 survivin RNA interference eukaryotic expression ve

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划(863计划)

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目的:构建针对人survivin基因的siRNA真核表达载体,检测其对人乳腺癌SKBr-3细胞中survivin基因表达的干涉作用.方法:将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入经HindⅢ和BglⅡ双酶切后的pSUPER真核表达载体.对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定.通过脂质体介导,把重组质粒稳定转染入SKBr-3细胞,RT-PCR、Western blot印记杂交和细胞免疫化学法检测其对mRNA和蛋白表达的干涉效果.结果:经酶切鉴定及基因测序证实,重组质粒中已插入目的基因片段.RT-PCR显示两个干涉载

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