【摘 要】
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用PCR技术,从一株田间分离的产气荚膜梭菌基因组中扩增出了1 194 bp的α毒素基因,经限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切处理后将其连接在经同样内切酶处理的载体pET／｜28a（＋）中
【基金项目】
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国家科技基础性工作专项（2008FY210200）
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用PCR技术,从一株田间分离的产气荚膜梭菌基因组中扩增出了1 194 bp的α毒素基因,经限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切处理后将其连接在经同样内切酶处理的载体pET／｜28a（＋）中的相应位点上,最后转化至受体菌BL21（DE3）中。经PCR、双酶切和核苷酸序列分析,证明重组质粒pET／｜28a／｜CPA含有产气荚膜梭菌α毒素基因,再将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导,目的基因获得了良好表达。以羊抗α毒素多克隆血清进行Western blot分析,抗血清可与该融合蛋白发生
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