【摘 要】
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目的:研究P21对POLD1基因的调控通路,以探索阻断癌细胞恶性增殖的机制.方法:实验主要分3组:阴性对照组(转染空载体pXJ41-neo的803-pXJ细胞）、空白对照组(胃癌细胞MGC-803)、实
【机 构】
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广西医科大学病理学 广西壮族自治区南宁市530021;廖柳凤,广西医科大学药理学 广西壮族自治区南宁市,530021;广西医科大学医学实验中心 广西壮族自治区南宁市 530021
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目的:研究P21对POLD1基因的调控通路,以探索阻断癌细胞恶性增殖的机制.方法:实验主要分3组:阴性对照组(转染空载体pXJ41-neo的803-pXJ细胞）、空白对照组(胃癌细胞MGC-803)、实验组（转染P21重组真核表达质粒pX J41 -p21的803-p21细胞）.MTT实验分析细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR技术检测基因表达水平的变化,Western blot分析蛋白表达差异.结果:MTT实验显示,与空白对照和阴性对照组相比,实验组细胞增殖受到明显抑制,凋亡率(％)增高（11.36±0.51 vs 7.39±0.17,7.69±0.47,F=85.338,均P＜0.05）.实验组P21 mRNA表达水平显著提高(2.15±0.23 vs 1.05±0.11,1.00±0.00,F=59.054,均P＜0.05),POLD1则显著下调(0.45±0.07 vs 1.09±0.13,1.00±0.00,F=49.907,均P＜0.05); P21、P125蛋白表达变化与基因变化相一致.cyclin E、Rbl基因表达均上调,CDK2基因表达下调,c-myc基因表达则变化不大.结论:P21抑制了胃癌细胞的增殖、促进其凋亡,同时抑制了POLD1基因的表达,这种抑制作用可能通过CDK2、cyclin E、Rb1等细胞周期因子实现.
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