【摘 要】
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目的建立一种简易快捷,适合大样本人群生物监测的微量全血法高通量彗星试验技术方法。方法选择1名不吸烟男性,探索微量全血法的彗星试验条件,建立了微量全血法的高通量彗星试
【机 构】
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潍坊医学院公共卫生与管理学院,山东潍坊261053;中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所,北京100050;潍坊医学院公共卫生与管理学院,山东潍坊,261053;中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒
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目的建立一种简易快捷,适合大样本人群生物监测的微量全血法高通量彗星试验技术方法。方法选择1名不吸烟男性,探索微量全血法的彗星试验条件,建立了微量全血法的高通量彗星试验方法。并在柴油机尾气(diesel engine exhaust,DEE)暴露人群中进行验证。结果经过对铺胶量和细胞上样量的探索,发现30μl细胞悬液能够均匀铺设到彗星玻片的小孔中,胶片表面比较平整,细胞基本为单层,经裂解液处理后也不易脱落。上样量中发现5μl抗凝全血与200μl琼脂糖凝胶混合,细胞分散均匀,间距适当,电泳后无细胞重叠,图像清晰容易分辨,对比度较高。在方法学的验证中,高通量彗星试验的结果显示,在DEE暴露组较对照组的彗星尾长、尾矩和尾部DNA百分含量均明显增加,板间及板内变异度小于10%。结论全血法高通量彗星实验适用于化学致癌物和污染物遗传损伤的检测。
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