【摘 要】
：
本试验旨在克隆出猪唾液酸黏附素的近氨基端结构域基因,进而构建原核表达载体并诱导表达重组蛋白,以制备多克隆抗体.试验中应用RT-PCR技术从健康仔猪肺巨噬细胞中克隆出猪唾
【机 构】
：
河南农业大学牧医工程学院,中国动物疫病预防控制中心
论文部分内容阅读
本试验旨在克隆出猪唾液酸黏附素的近氨基端结构域基因,进而构建原核表达载体并诱导表达重组蛋白,以制备多克隆抗体.试验中应用RT-PCR技术从健康仔猪肺巨噬细胞中克隆出猪唾液酸黏附素的近氨基端结构域的cDNA序列,并将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-Sn150,成功表达了分子质量大小约为43.1 ku的γ亚单位重组蛋白.将重组蛋白pET-Sn150免疫小鼠,制备获得鼠抗pET-Sn150重组蛋白多克隆抗体,将得到的重组蛋白多克隆抗体采用间接ELISA和Western blotting试验方法检测,ELISA测定多克隆抗体的血清效价为1∶12800; Western blotting试验结果证明,制备的鼠抗pET-Sn150多克隆抗体可以与重组蛋白进行特异性结合,从而证明重组蛋白具有较好的免疫原性.本试验克隆出猪唾液酸黏附素的近氨基端结构域基因并成功表达,为进一步研究其结构与功能奠定了基础.
其他文献
本研究旨在探讨营养与品种对肉牛血清中磷酸腺苷活化蛋白激酶( AMPK)活性的影响及AMPK活性与血液生化指标的关系.选取体重为250 kg左右的西杂牛35头、利杂牛26头、夏杂牛24头
采用不同的方法对来源不同地区的4个甜高粱品种叶片不同部位的抗氧化物质黄酮、SOD、维生素C进行动态研究,结果表明:甜高粱不同品种均表现为叶肉中黄酮、维生素C含量高,叶脉
全世界大概有150种魟鱼,大多分布在热带和亚热带的海洋里,少数种类生活在近赤道的淡水河流域[1].由于魟鱼的尾部具有毒棘,人魟鱼中毒的案例时有发生,美国每年有750~2000例魟
近年来蔬菜地面积快速增加已成为我国农田土壤碳库变化的重要驱动因素,研究蔬菜种植方式对农田土壤固碳影响,对于揭示我国农田土壤碳库变化具有重要意义.通过实地调查与采样
前期研究结果证明抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5蛋白的抗独特型抗体特异性结合Marc-145细胞上的非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(Nonmuscle myosin heavy chainⅡ-A,NMHCⅡ-A
人体运动时肌肉活动模式的了解与掌握对运动障碍患者的康复治疗有重要的指导意义.该文利用负荷作用下手臂运动时产生的表面肌电信号(EMG),结合三维运动测量系统,提取肌电信号
The crude enzyme (PH-1) isolated from Pseudostellaria heterophylla by our group has catalyzed enzymatic cyclization of linear peptide NH2-Gly1-Gly2-Leu-Pro-Pro-
Objective This review discusses the experimental and clinical studies those show the expression of connexin 36 in the central nervous system and the possible ro
Accelerated industrialization and urbanization,and unregulated disposal of waste of electric and electronic equipment (e-waste)in China have caused environmenta