【摘 要】
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目的:快速构建人大肠癌细胞HRT-18的定向Cdna文库.方法: 从人大肠癌细胞HRT-18中抽提总RNA后磁珠法分离Mrna,以含sfiⅠ酶切位点的oligo(Dt)引物合成Cdna的第一链,利用SMART(s
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目的:快速构建人大肠癌细胞HRT-18的定向Cdna文库.方法: 从人大肠癌细胞HRT-18中抽提总RNA后磁珠法分离Mrna,以含sfiⅠ酶切位点的oligo(Dt)引物合成Cdna的第一链,利用SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)技术,经LD-PCR合成双链Cdna,该产物经sfiⅠ酶切后分级分离,插入片段与λTripIEx2载体连接经体外包装成噬菌体Cdna文库.结果: 经鉴定该文库含 6.5×106个重组子,重组率&g
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