鸡α-干扰素成熟肽的原核表达及其多价血清的制备

来源 :扬州大学学报：农业与生命科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tank2203555

【摘要】

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以PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素的成熟肽基因序列,构建原核表达质粒pET32a-α和pGEX6p-α;SDS-PAGE及Western blotting法检测两载体特异性表达成熟肽;

【作者】

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王永娟朱善元左伟勇韩小英吴双王安平洪伟鸣黄文强

【机构】

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江苏畜牧兽医职业技术学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室

【出处】

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扬州大学学报：农业与生命科学版

【发表日期】

：

2013年1期

【关键词】

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鸡 Α-干扰素原核表达抗体 chicken IFN-α prokaryotic expression antibody

【基金项目】

：

江苏省教育厅科技产业化推进项目（JHZD09-71）, 江苏畜牧兽医职业技术学院博士启动基金项目（ZD200908）, 江苏畜牧兽医职业技术学院重点支持项目（ZD1204）

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以PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素的成熟肽基因序列,构建原核表达质粒pET32a-α和pGEX6p-α;SDS-PAGE及Western blotting法检测两载体特异性表达成熟肽;将纯化的pET32a-α诱导表达产物免疫小鼠,收获小鼠血清并以pGEX6p-α诱导表达产物检测其中特异性抗体滴度。结果表明：扩增的鸡α-干扰素成熟肽基因成功表达,原核表达产物免疫小鼠可产生特异性抗体,抗体效价为1∶12 000。其结果为制备安全、高效的重组干扰素奠定了基础,为定量检测机体内产生的α干扰素进

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