大肠杆菌F18菌毛操纵子全基因克隆、表达及生物学活性

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【摘要】

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利用PCR技术以猪产肠毒素大肠杆菌F18标准菌株107/86和2134P基因组DNA为模板成功地扩增出编码F18ab和F18ac完整菌毛操纵子fed基因。将它们分别克隆入表达质粒载体pET-22b（＋）,结

【作者】

：

张建军朱国强

【机构】

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扬州大学兽医学院

【出处】

：

微生物学报

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

产肠毒素大肠杆菌 F18菌毛 fed基因表达生物活性 Enterotoxigenic Escherichia coli F18ab and F18ac fim

【基金项目】

：

江苏省六大人才高峰项目（2006）,美国农业部USDA高新技术资助项目（2002-35204-12216）致谢本项目得到美国宾夕法尼亚大学Schifferli教授的大力资助!

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利用PCR技术以猪产肠毒素大肠杆菌F18标准菌株107/86和2134P基因组DNA为模板成功地扩增出编码F18ab和F18ac完整菌毛操纵子fed基因。将它们分别克隆入表达质粒载体pET-22b（＋）,结合酶切和核苷酸序列分析证明了PCR预期扩增产物的正确性。然后将克隆的重组载体DNA转化至大肠杆菌BL21（DE3）,构建和筛选出分别含F18ab和F18ac完整fed基因的重组菌,经过IPTG诱导表达,在电镜下观察到上述两种重组菌能分别大量表达F18ab和F18ac菌毛。用热抽提法提纯其诱导表达的F18

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