【摘 要】
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以包含质粒pET—Trx—CAD—BuforinⅡ的大肠杆菌BL21（DE3）为研究对象，开发了一种利用乳糖自诱导方式表达天蚕素AD和蛙BuforinⅡ的表达系统。首先，在LB培养基中研究了乳糖浓度、诱
【机 构】
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山东省科学院中日友好生物技术研究中心
【基金项目】
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山东省科技发展计划（2011GSF12107、2009GG10009012）,济南市科技计划项目-企业自主创新计划（201201077）资助
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以包含质粒pET—Trx—CAD—BuforinⅡ的大肠杆菌BL21（DE3）为研究对象，开发了一种利用乳糖自诱导方式表达天蚕素AD和蛙BuforinⅡ的表达系统。首先，在LB培养基中研究了乳糖浓度、诱导时机和诱导时间对目的蛋白表达的影响。然后，利用“分解代谢物阻遏”原理构建乳糖自诱导表达系统，以“葡萄糖＋主碳源”两种碳源的依次代谢将蛋白表达过程分为两个阶段：第一阶段为菌体生长阶段，菌体利用葡萄糖生长，乳糖无法进入细胞诱导蛋白表达；第二阶段为蛋白表达阶段，葡萄糖耗尽，菌体开始利用主碳源生长；同时乳糖进入细
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