【摘 要】
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目的 以华支睾吸虫排泄分泌抗原（ESA）免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法 用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾
【机 构】
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徐州医科大学病原生物学教研室,江苏省病原生物学重点实验室
【基金项目】
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高等学校大学生实践创新训练计划立项项目(No.2012JSSPITP1850);徐州医科大学科研课题(No.2012KJ13)~~
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目的 以华支睾吸虫排泄分泌抗原（ESA）免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法 用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效价单克隆抗体并鉴定;单抗经HRP标记和配对筛选,建立双抗夹心ELISA并分析其特异性及灵敏度。结果 成功制备出抗华支睾吸虫ESA Mc Ab:B7、F1;抗体类型均为IgG1,抗体滴度高,特异性好,以筛选到的两株单抗建立双抗夹心ELISA法,最佳线性范围为0.014～0.248μg/m L,（R2=0.9969）,最低检出限为0.014μg/mL。结论 初步建立了检测华支睾吸虫ESA的免疫诊断方法。
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