利用酵母双杂交系统筛选春兰开花调控蛋白DEF3的互作蛋白

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为了探究春兰DEF3蛋白与其它花发育蛋白之间的相互作用,本研究以春兰为实验材料,克隆了18种花发育相关基因:AP1-2、AP1-3、AP2-1、AP2-2、AG1、AG2、AG3、DEF1、DEF2、DEF3、DEF4、GLO、SEP1、SEP2、SEP3、SEP4、AGL6-1、AGL6-3。利用酵母双杂交体系,构建了诱饵质粒p GBKT7-DEF3及18种猎物质粒,并通过实验验证诱饵质粒没有自激活现象。进行酵母双杂交实验,最终获得六个蛋白与DEF3互作,分别是:AP1-2、GLO、AG1、SEP2、SEP4、AGL6-3。 In order to explore the interaction between Chunlan DEF3 protein and other flower developmental proteins, we cloned 18 kinds of flower development related genes (AP1-2, AP1-3, AP2-1, AP2-2, AG1, AG2, AG3, DEF1, DEF2, DEF3, DEF4, GLO, SEP1, SEP2, SEP3, SEP4, AGL6-1, AGL6-3. The bait plasmid pGBKT7-DEF3 and 18 kinds of prey plasmids were constructed by yeast two-hybrid system. The bait plasmid did not self-activate by experiments. Yeast two-hybrid experiments, the final six proteins interact with DEF3, namely: AP1-2, GLO, AG1, SEP2, SEP4, AGL6-3.
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