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摘要 [目的]为了快速、精确检测贮藏大米中的霉菌菌落总数，拟用高光谱图像技术实现无损检测。[方法]采用SG-SNV detrending的方式对原始光谱数据预处理，去除基线散射，平滑光谱曲线;然后分别利用SPA算法和CARS算法选取反映大米霉菌菌落总数特性的特征波长组合，最后采用SVR方法分别在全光谱数据和2种特征光谱数据的基础上建立预测模型，对比分析各SVR模型的预测效果。[结果]基于CARS特征选择的模型（CARS-SVR）预测效果优于基于全光谱数据的SVR模型和基于SPA特征选择的模型（SPA-SVR），其预测集决定系数（R2p）为0.875 9、均方根误差（RMSEP）为0.083 5。由于CARS-SVR模型的预测效果尚未达到农产品检测的精度要求，故引入GWO算法对SVR模型中的参数（c和g）寻优，优化后模型（CARS-GWO-SVR）的训练集和测试集决定系数（R2c和R2p）分别达0.962 1和0.951 1。[结论]利用高光谱技术对贮藏大米中的霉菌菌落总数实施无损检测具有可行性，可为其他农产品的霉菌检测提供参考依据。
关键词 高光谱;贮藏大米;霉菌菌落数;灰狼优化;支持向量回归
中图分类号 S379 文献标识码 A
文章编号 0517-6611（2020）19-0211-04
doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.19.055
Abstract [Objective]In order to quickly and accurately detect the total number of mold colonies in stored rice， hyperspectral image technology was proposed to achieve nondestructive detection.[Method]The original spectral data was preprocessed through the method of SGSNV detrending for purpose of removing the baseline scattering and smoothing spectral curves. Then the combination of feature wavelengths reflecting the mold characteristics was selected by SPA and CARS， respectively. On the basis of feature data and full spectral data， the prediction models of mold colonies in stored rice samples were established through SVR method， and the prediction results of models would be compared and analyzed.[Result]The effect of CARSSVR model was better than that of SVR model and SPASVR model. The R2p and RMSEP of prediction set was 0.875 9 and 0.083 5. In order to improve the accuracy of CARSSVR model， GWO algorithm was adopted to optimize c and g parameters in model， after that， the R2c and R2p were improved to 0.962 1 and 0.951 1. [Conclusion]Hyperspectral imaging technology is feasible for nondestructive detection of the total number of mold colonies in stored rice， providing a promising tool for mold detection of other agricultural products.
Key words Hyperspectral;Stored rice;Mold colonies;GWO;SVR
基金項目 国家自然科学基金项目（31471413）;无锡市软科学课题（201913571004Z）。
作者简介 丛孙丽（1993—），女，江苏南通人，助教，硕士，从事计算机技术在农业工程方面的应用研究。
收稿日期 2020-04-08
大米作为人们重要的主食之一，营养较为丰富，若贮藏不当易发生霉变。大米发生霉变开始产生霉菌，严重程度下甚至进而产生真菌毒素，霉菌和真菌毒素直接影响大米的品质、人们的食用安全，造成健康隐患[1]。霉菌的多少直接反映了大米等食品的劣变程度，因此，寻求一种贮藏大米霉菌含量的快速、准确检测方法显得尤为必要。
常规情况下，大米霉菌计数可采用国标法（GB 4789.15—2016《食品微生物学检验 霉菌和酵母计数》[2]）进行测定。这种方法检测精度可靠性高，但前期样品准备工作复杂，且破坏了检测对象。随着光谱检测技术的快速发展，近红外光谱技术势头迅猛，作为无损检测方法之一在稻谷类霉菌或真菌毒素检测中应用典型[3-4]。这些研究表明，近红外光谱用于农副产品霉菌或真菌毒素检测是可行的。然而，这一技术的缺点在于主要用于检测样本的平均光谱，并不能提供样本图像中每一像素包含的光谱信息。因此，利用近红外光谱定量检测霉菌的精度较低。高光谱图像技术将光谱和图像技术融于一体，同时提供检测目标的光谱和图像信息，在农产品无损检测中应用较为广泛。一些学者已经将高光谱图像技术用于作物或农产品的霉菌或真菌毒素定性检测[5-7]，但相关定量研究仍较少。Tekle等[8]获取了镰刀菌损伤的燕麦的高光谱图像，并建立偏最小二乘支持向量回归模型估算其中脱氧雪腐烯醇（DON）的含量，最终预测值与实测值之间的相关系数为0.82，预测精度较低。霉菌不仅会改变大米的颜色和其他表面特性，也会积累更多脂肪酸代谢物，从而提高大米中的脂肪酸含量。因此，脂肪酸含量的改变可以较好地表征大米霉变的状况[9]。研究表明，可见光光谱可在样品的表面形态（包括纹理、形状等）的表征上达到较好的效果，但可见光的单波段信息不足以提高检测精度;而大米中脂肪酸含量的变化又会促使近红外光谱特性的变化[10]。高光谱图像技术主要涵盖了可见光光谱和近红外光谱的波段范围，被视为大米霉菌含量检测最有效的方法。 笔者采用高光谱技术结合支持向量回归（support vector regression， SVR）模型实现大米样品中霉菌菌落总数的检测，为了寻找模型中的最佳参数（c和g）采用了新型群体智能算法——灰狼优化（gray wolf optimization， GWO）。通过对大米霉菌的高精度定量检测，可为其他农产品的霉菌检测提供新型方法，也为研制便携霉菌检测仪奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 人工诱导大米样品
试验选用大米为优质金龙鱼大米，购于镇江欧尚超市，确保大米完整、表面光滑无霉变。试验前须先测定所购大米的初始含水率，根据国标法（GB 5009.3—2016《食品中水分的测定》[11]）实际检测得出结果为11.4%，在大米安全贮藏标准范围内。首先，将大米分成100个样品盘（每盘100 g），单独贴上标签。为去除大米中细菌带来的影响，所有大米均需经过消毒，将大米样品置于干净的工作台上，打开紫外线长达30 min。灭菌完成后，在无菌状态下进一步诱导大米发生霉变。当储存过程中霉菌含量低于104 CFU/g时，说明大米存放安全;一旦达到105 CFU/g，大米便开始发生霉变;超过106 CFU/g后，霉变则非常严重[12]。因此，为了模拟贮藏大米霉变的过程，试验采取恒温恒湿箱培育大米样品，其中恒温恒湿箱的温度设定为30 ℃，相对湿度设定为90%（参照霉菌易于繁殖的温湿度环境）。基于大米贮藏过程中理化特性与感光指标随时间的变异情况，将培育阶段分成10个周期（每个周期15 d），得到不同霉变时期内的样品各10份（共100份）。
1.2 高光谱扫描
试验中，采用光谱为871.607～1 766.322 nm的高光谱成图像系统[13]，其中CCD相机与光谱仪共同构成高光谱图像摄像仪（ImSpector V10E，spectra imaging Ltd.，Finland），2只150 W的卤素灯构成系统的光源，一个电控位移平台及计算机。此系统采集的图像分辨率达到672像素×512像素，光谱分辨率达5 nm。试验开始前，预先对高光谱系统进行黑白参考校正，然后将培育的各份大米样品均匀平铺于一宽口的PP试剂瓶瓶盖上，并缓慢放置于电控位移平台正中央的白纸中心，以待对样品进行扫描采集图像。扫描过程中摄像机曝光时间为20 ms，平移台输送速度为1.25 mm/s。所有样品扫描完成后利用感兴趣区域法将每个样品图像中的光谱数据提取出来，考虑到光谱范围的初始和结束部分均受到了外部噪声的影响，故将前后共40个波段的数据予以剔除，最终波长931～1 666 nm用于分析。
1.3 霉菌菌落总数检测
高光谱扫描后立即对各份大米样品进行霉菌菌落总数检测，检测方法参照文献[2]。检测过程中观察霉菌的滋生状况以CFU/g为单位进行平板计数。最终，将记录的数值取对数处理，降低量纲的影响，以便建模分析。
1.4 灰狼算法优化的支持向量回归机
支持向量机是1995年提出用于建立模型的方法，该研究中其回归功能SVR用于预测大米霉菌菌落数，一般将径向基核函数（radial basis function， RBF）用于模型。
GWO算法于2012年新提出，提出的依据是灰狼群体的觅食行为，如捕食期间产生的跟踪、包围、追击等。该算法的机制简单、参数少、收敛速度快，且相对于其他智能算法（DE、PSO、GA等）优化效果更好[14]，也因此在风速预测、水量分配、函数优化等领域应用广泛。该研究将GWO算法用于对SVR参数c和g寻优的具体步骤如下：①划分大米霉菌数据样本集。初始化SVR的参数c和g的取值区间，并设置GWO算法的相关参数（狼群数量SearchAgents_no以及最大迭代次数Max_iteration）。其中，c和g的取值均为0.01～100.00，SearchAgents_no和Max_iteration取值均为20。②随机化灰狼的群体，各群体位置向量对应于一组参数（c和g）。③GWO算法根据适应度值对狼群中每个个体的位置进行更新，最终保留适应度值最优的位置。④判断更新次数是否超过Max_iteration值，若未超过，继续更新，否则更新结束。此时的参数c和g即最优参数，可利用其建立SVR最优模型进行菌落数预测分析。
2 结果与分析
2.1 大米霉菌菌落数参考值
采用平板计数法测得的霉菌菌落数参考值如表1所示。所有大米样品的霉菌菌落数分布在2.66～5.88 lg（CFU/g）。根据大米贮藏的霉菌标准，该试验中霉菌菌落总数分布既有安全阶段，又有大米贮藏的不同霉变阶段，总体上霉菌菌落值符合正態分布。从表1可看出校正集和测试集样品的霉菌统计值。
2.2 数据预处理 依据1∶1的比例对高光谱数据进行样本集划分，分成校正集和测试集两部分。多项式平滑（savitzkygolay， SG）、标准变量变换（standard normalized variable， SNV）及去趋势（detrending）均是可用于光谱预处理的方法[15-17]。其中SG可有效消除基线漂移，SNV可校正光谱散射，detrending一般与SNV结合用于去趋势。考虑到每种预处理方法的差异性，以上3种方法结合（SG-SNV detrending）用于处理并保留光谱数据中的有效信息。预处理前后的光谱曲线如图1所示。
2.3 特征波长选择
2.3.1 采用SPA选择特征波长。
连续投影算法（successive projections algorithm， SPA）因简单、快速的特点在特征选择上得到了广泛的应用[18]。该研究将SPA波长最大值设为30，算法运行过程中不同的波长数会产生不同的均方根误差（root mean square error， RMSE），当RMSE值变化达到最小值时所产生的波长即最佳。该研究的RMSE最小为0.602，此时产生了12个特征波长。选取的波长如图2所示。 2.3.2 采用CARS選择特征波长。
竞争性自适应重加权采样（competitive adaptive reweighted sampling， CARS）作为特征选择法之一，模拟“适者生存”准则，通过指数衰减和自适应重加权采样（ARS）技术选出最终交叉验证均方根误差（RMSECV）最小下的特征集合[19]。该研究设定CARS采样次数为50及五折交叉验证，过程如图3所示。由图3a看出选择的特征波长数随着采样次数增加在逐渐减少;图3c中星号垂线对应的点即为b图中RMSECV的最小值点（0.462），此时的采样次数为30。此后，RMSECV值有增加的趋势。因此，选取采样次数为30时的特征波长共14个，分别为935.96、944.25、1 012.17、1 031.34、1 129.52、1 136.48、1 157.13、1 160.54、1 319.84、1 341.85、1 344.99、1 426.69、1 474.49、1 513.47 nm。
大米中最多的脂肪酸是油酸（OFA）和亚油酸（LFA）[20]。Mzimbiri等[21]研究了这2种脂肪酸在900～1 700 nm处的高光谱特征，其中OFA的特征波长理论上为1 146.6、1 313.3和1 480.3 nm，该研究SPA选择的波长中1 146.85 nm与OFA第1个理论波长较为接近，而CARS选择的波长中1 319.84、1 474.49 nm与第2、第3个较为接近;LFA的特征波长理论上为1 036.9和1 517.1 nm，该研究SPA选择的波长中1 031.34 nm与LFA第1个理论波长较为接近，而CARS选择的波长中1 031.34、1 513.47 nm与2个理论波长均较接近。因此，相比之下CARS算法保留了反映大米样品霉菌菌落总数的更多特征信息，大大降低建模复杂度。
2.4 SVR模型的建立与分析
将特征光谱和全光谱数据分别用于SVR回归模型的输入变量，大米霉菌菌落总数作为输出变量，通过校正集样本和测试集样本的预测来评估最终模型的性能。从SVR各模型的评价指标对比（表2）可以看出，与SVR模型相比，SPA-SVR模型虽然是通过SPA极大地减少了输入变量，但性能却有所降低。原因可能是SPA算法在运行过程中剔除了部分与霉菌数量相关性较大的关键波长。相比之下，CARS-SVR模型虽然采用的特征波长数较多，但模型的预测性能和鲁棒性明显更好，也进一步印证了前面特征波长的分析。因此，3种模型中最佳的为CARS-SVR，达到了最高预测精度，R2p为0.875 9且RMSEP为0.083 5。
2.5 GWO-SVR模型的建立
为提高CARS-SVR模型的检测精度，在经过CARS特征光谱数据的基础上，引入GWO算法优化SVR模型中的参数c和g。然后利用最优参数重新建立特征光谱下的SVR模型。优化后模型（CARS-GWO-SVR）的各评价指标分别为波长数量14、R2c=0.962 1、RMSEC=0.012 6、R2p=0.951 1、RMSEP=0.036 0，模型对测试集样本的预测结果如图4所示。从图4可以看出， CARS-GWO-SVR模型预测效果得到了明显的提升，P2p达到了0.95以上。同时，与CARS-SVR相比，CARS-GWO-SVR的RMSEC和RMSEP差异更小，表明模型鲁棒性和预测能力更强。与Tekle等[8]关于利用高光谱图像估算燕麦中DON含量的相比，该研究大米霉菌含量的预测精度更高，表明GWO算法确实优化了模型的性能。
3 结论
该研究培育了不同霉变程度的大米样品并采集了高光谱图像，通过感兴趣区域选取方式获取了32像素×32 像素的光谱信息。在预处理之后的光谱基础上，比较了基于全光谱数据和不同特征光谱数据的SVR模型建模效果。结果表明：CARS-SVR模型获得了比全光谱模型和SPA-SVR模型更好的预测效果，其训练集R2c和RMSEC分别为0.879 5、0.046 8;测试集R2p和RMSEP分别为0.875 9、0.083 5。利用GWO算法对SVR模型中的参数c和g进行寻优，重新建立基于CARS特征光谱数据的SVR预测模型。最终，CARS-GWO-SVR模型的R2c和R2p分别提升为0.962 1和0.951 1，满足农产品的检测要求。
综上所述，该研究将高光谱图像技术用于大米霉菌菌落总数检测具有可行性，为其他农产品的霉菌检测提供新型方法，也为研制便携霉菌检测仪奠定理论基础。不足之处在于用于研究的样品数量有待提高以验证是否适用于更多种类的大米霉菌检测，有待进一步研究。
参考文献
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关键词 高光谱;贮藏大米;霉菌菌落数;灰狼优化;支持向量回归
中图分类号 S379 文献标识码 A
文章编号 0517-6611（2020）19-0211-04
doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.19.055
Abstract [Objective]In order to quickly and accurately detect the total number of mold colonies in stored rice， hyperspectral image technology was proposed to achieve nondestructive detection.[Method]The original spectral data was preprocessed through the method of SGSNV detrending for purpose of removing the baseline scattering and smoothing spectral curves. Then the combination of feature wavelengths reflecting the mold characteristics was selected by SPA and CARS， respectively. On the basis of feature data and full spectral data， the prediction models of mold colonies in stored rice samples were established through SVR method， and the prediction results of models would be compared and analyzed.[Result]The effect of CARSSVR model was better than that of SVR model and SPASVR model. The R2p and RMSEP of prediction set was 0.875 9 and 0.083 5. In order to improve the accuracy of CARSSVR model， GWO algorithm was adopted to optimize c and g parameters in model， after that， the R2c and R2p were improved to 0.962 1 and 0.951 1. [Conclusion]Hyperspectral imaging technology is feasible for nondestructive detection of the total number of mold colonies in stored rice， providing a promising tool for mold detection of other agricultural products.
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作者简介 丛孙丽（1993—），女，江苏南通人，助教，硕士，从事计算机技术在农业工程方面的应用研究。
收稿日期 2020-04-08
大米作为人们重要的主食之一，营养较为丰富，若贮藏不当易发生霉变。大米发生霉变开始产生霉菌，严重程度下甚至进而产生真菌毒素，霉菌和真菌毒素直接影响大米的品质、人们的食用安全，造成健康隐患[1]。霉菌的多少直接反映了大米等食品的劣变程度，因此，寻求一种贮藏大米霉菌含量的快速、准确检测方法显得尤为必要。
常规情况下，大米霉菌计数可采用国标法（GB 4789.15—2016《食品微生物学检验 霉菌和酵母计数》[2]）进行测定。这种方法检测精度可靠性高，但前期样品准备工作复杂，且破坏了检测对象。随着光谱检测技术的快速发展，近红外光谱技术势头迅猛，作为无损检测方法之一在稻谷类霉菌或真菌毒素检测中应用典型[3-4]。这些研究表明，近红外光谱用于农副产品霉菌或真菌毒素检测是可行的。然而，这一技术的缺点在于主要用于检测样本的平均光谱，并不能提供样本图像中每一像素包含的光谱信息。因此，利用近红外光谱定量检测霉菌的精度较低。高光谱图像技术将光谱和图像技术融于一体，同时提供检测目标的光谱和图像信息，在农产品无损检测中应用较为广泛。一些学者已经将高光谱图像技术用于作物或农产品的霉菌或真菌毒素定性检测[5-7]，但相关定量研究仍较少。Tekle等[8]获取了镰刀菌损伤的燕麦的高光谱图像，并建立偏最小二乘支持向量回归模型估算其中脱氧雪腐烯醇（DON）的含量，最终预测值与实测值之间的相关系数为0.82，预测精度较低。霉菌不仅会改变大米的颜色和其他表面特性，也会积累更多脂肪酸代谢物，从而提高大米中的脂肪酸含量。因此，脂肪酸含量的改变可以较好地表征大米霉变的状况[9]。研究表明，可见光光谱可在样品的表面形态（包括纹理、形状等）的表征上达到较好的效果，但可见光的单波段信息不足以提高检测精度;而大米中脂肪酸含量的变化又会促使近红外光谱特性的变化[10]。高光谱图像技术主要涵盖了可见光光谱和近红外光谱的波段范围，被视为大米霉菌含量检测最有效的方法。 笔者采用高光谱技术结合支持向量回归（support vector regression， SVR）模型实现大米样品中霉菌菌落总数的检测，为了寻找模型中的最佳参数（c和g）采用了新型群体智能算法——灰狼优化（gray wolf optimization， GWO）。通过对大米霉菌的高精度定量检测，可为其他农产品的霉菌检测提供新型方法，也为研制便携霉菌检测仪奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 人工诱导大米样品
试验选用大米为优质金龙鱼大米，购于镇江欧尚超市，确保大米完整、表面光滑无霉变。试验前须先测定所购大米的初始含水率，根据国标法（GB 5009.3—2016《食品中水分的测定》[11]）实际检测得出结果为11.4%，在大米安全贮藏标准范围内。首先，将大米分成100个样品盘（每盘100 g），单独贴上标签。为去除大米中细菌带来的影响，所有大米均需经过消毒，将大米样品置于干净的工作台上，打开紫外线长达30 min。灭菌完成后，在无菌状态下进一步诱导大米发生霉变。当储存过程中霉菌含量低于104 CFU/g时，说明大米存放安全;一旦达到105 CFU/g，大米便开始发生霉变;超过106 CFU/g后，霉变则非常严重[12]。因此，为了模拟贮藏大米霉变的过程，试验采取恒温恒湿箱培育大米样品，其中恒温恒湿箱的温度设定为30 ℃，相对湿度设定为90%（参照霉菌易于繁殖的温湿度环境）。基于大米贮藏过程中理化特性与感光指标随时间的变异情况，将培育阶段分成10个周期（每个周期15 d），得到不同霉变时期内的样品各10份（共100份）。
1.2 高光谱扫描
试验中，采用光谱为871.607～1 766.322 nm的高光谱成图像系统[13]，其中CCD相机与光谱仪共同构成高光谱图像摄像仪（ImSpector V10E，spectra imaging Ltd.，Finland），2只150 W的卤素灯构成系统的光源，一个电控位移平台及计算机。此系统采集的图像分辨率达到672像素×512像素，光谱分辨率达5 nm。试验开始前，预先对高光谱系统进行黑白参考校正，然后将培育的各份大米样品均匀平铺于一宽口的PP试剂瓶瓶盖上，并缓慢放置于电控位移平台正中央的白纸中心，以待对样品进行扫描采集图像。扫描过程中摄像机曝光时间为20 ms，平移台输送速度为1.25 mm/s。所有样品扫描完成后利用感兴趣区域法将每个样品图像中的光谱数据提取出来，考虑到光谱范围的初始和结束部分均受到了外部噪声的影响，故将前后共40个波段的数据予以剔除，最终波长931～1 666 nm用于分析。
1.3 霉菌菌落总数检测
高光谱扫描后立即对各份大米样品进行霉菌菌落总数检测，检测方法参照文献[2]。检测过程中观察霉菌的滋生状况以CFU/g为单位进行平板计数。最终，将记录的数值取对数处理，降低量纲的影响，以便建模分析。
1.4 灰狼算法优化的支持向量回归机
支持向量机是1995年提出用于建立模型的方法，该研究中其回归功能SVR用于预测大米霉菌菌落数，一般将径向基核函数（radial basis function， RBF）用于模型。
GWO算法于2012年新提出，提出的依据是灰狼群体的觅食行为，如捕食期间产生的跟踪、包围、追击等。该算法的机制简单、参数少、收敛速度快，且相对于其他智能算法（DE、PSO、GA等）优化效果更好[14]，也因此在风速预测、水量分配、函数优化等领域应用广泛。该研究将GWO算法用于对SVR参数c和g寻优的具体步骤如下：①划分大米霉菌数据样本集。初始化SVR的参数c和g的取值区间，并设置GWO算法的相关参数（狼群数量SearchAgents_no以及最大迭代次数Max_iteration）。其中，c和g的取值均为0.01～100.00，SearchAgents_no和Max_iteration取值均为20。②随机化灰狼的群体，各群体位置向量对应于一组参数（c和g）。③GWO算法根据适应度值对狼群中每个个体的位置进行更新，最终保留适应度值最优的位置。④判断更新次数是否超过Max_iteration值，若未超过，继续更新，否则更新结束。此时的参数c和g即最优参数，可利用其建立SVR最优模型进行菌落数预测分析。
2 结果与分析
2.1 大米霉菌菌落数参考值
采用平板计数法测得的霉菌菌落数参考值如表1所示。所有大米样品的霉菌菌落数分布在2.66～5.88 lg（CFU/g）。根据大米贮藏的霉菌标准，该试验中霉菌菌落总数分布既有安全阶段，又有大米贮藏的不同霉变阶段，总体上霉菌菌落值符合正態分布。从表1可看出校正集和测试集样品的霉菌统计值。
2.2 数据预处理 依据1∶1的比例对高光谱数据进行样本集划分，分成校正集和测试集两部分。多项式平滑（savitzkygolay， SG）、标准变量变换（standard normalized variable， SNV）及去趋势（detrending）均是可用于光谱预处理的方法[15-17]。其中SG可有效消除基线漂移，SNV可校正光谱散射，detrending一般与SNV结合用于去趋势。考虑到每种预处理方法的差异性，以上3种方法结合（SG-SNV detrending）用于处理并保留光谱数据中的有效信息。预处理前后的光谱曲线如图1所示。
2.3 特征波长选择
2.3.1 采用SPA选择特征波长。
连续投影算法（successive projections algorithm， SPA）因简单、快速的特点在特征选择上得到了广泛的应用[18]。该研究将SPA波长最大值设为30，算法运行过程中不同的波长数会产生不同的均方根误差（root mean square error， RMSE），当RMSE值变化达到最小值时所产生的波长即最佳。该研究的RMSE最小为0.602，此时产生了12个特征波长。选取的波长如图2所示。 2.3.2 采用CARS選择特征波长。
竞争性自适应重加权采样（competitive adaptive reweighted sampling， CARS）作为特征选择法之一，模拟“适者生存”准则，通过指数衰减和自适应重加权采样（ARS）技术选出最终交叉验证均方根误差（RMSECV）最小下的特征集合[19]。该研究设定CARS采样次数为50及五折交叉验证，过程如图3所示。由图3a看出选择的特征波长数随着采样次数增加在逐渐减少;图3c中星号垂线对应的点即为b图中RMSECV的最小值点（0.462），此时的采样次数为30。此后，RMSECV值有增加的趋势。因此，选取采样次数为30时的特征波长共14个，分别为935.96、944.25、1 012.17、1 031.34、1 129.52、1 136.48、1 157.13、1 160.54、1 319.84、1 341.85、1 344.99、1 426.69、1 474.49、1 513.47 nm。
大米中最多的脂肪酸是油酸（OFA）和亚油酸（LFA）[20]。Mzimbiri等[21]研究了这2种脂肪酸在900～1 700 nm处的高光谱特征，其中OFA的特征波长理论上为1 146.6、1 313.3和1 480.3 nm，该研究SPA选择的波长中1 146.85 nm与OFA第1个理论波长较为接近，而CARS选择的波长中1 319.84、1 474.49 nm与第2、第3个较为接近;LFA的特征波长理论上为1 036.9和1 517.1 nm，该研究SPA选择的波长中1 031.34 nm与LFA第1个理论波长较为接近，而CARS选择的波长中1 031.34、1 513.47 nm与2个理论波长均较接近。因此，相比之下CARS算法保留了反映大米样品霉菌菌落总数的更多特征信息，大大降低建模复杂度。
2.4 SVR模型的建立与分析
将特征光谱和全光谱数据分别用于SVR回归模型的输入变量，大米霉菌菌落总数作为输出变量，通过校正集样本和测试集样本的预测来评估最终模型的性能。从SVR各模型的评价指标对比（表2）可以看出，与SVR模型相比，SPA-SVR模型虽然是通过SPA极大地减少了输入变量，但性能却有所降低。原因可能是SPA算法在运行过程中剔除了部分与霉菌数量相关性较大的关键波长。相比之下，CARS-SVR模型虽然采用的特征波长数较多，但模型的预测性能和鲁棒性明显更好，也进一步印证了前面特征波长的分析。因此，3种模型中最佳的为CARS-SVR，达到了最高预测精度，R2p为0.875 9且RMSEP为0.083 5。
2.5 GWO-SVR模型的建立
为提高CARS-SVR模型的检测精度，在经过CARS特征光谱数据的基础上，引入GWO算法优化SVR模型中的参数c和g。然后利用最优参数重新建立特征光谱下的SVR模型。优化后模型（CARS-GWO-SVR）的各评价指标分别为波长数量14、R2c=0.962 1、RMSEC=0.012 6、R2p=0.951 1、RMSEP=0.036 0，模型对测试集样本的预测结果如图4所示。从图4可以看出， CARS-GWO-SVR模型预测效果得到了明显的提升，P2p达到了0.95以上。同时，与CARS-SVR相比，CARS-GWO-SVR的RMSEC和RMSEP差异更小，表明模型鲁棒性和预测能力更强。与Tekle等[8]关于利用高光谱图像估算燕麦中DON含量的相比，该研究大米霉菌含量的预测精度更高，表明GWO算法确实优化了模型的性能。
3 结论
该研究培育了不同霉变程度的大米样品并采集了高光谱图像，通过感兴趣区域选取方式获取了32像素×32 像素的光谱信息。在预处理之后的光谱基础上，比较了基于全光谱数据和不同特征光谱数据的SVR模型建模效果。结果表明：CARS-SVR模型获得了比全光谱模型和SPA-SVR模型更好的预测效果，其训练集R2c和RMSEC分别为0.879 5、0.046 8;测试集R2p和RMSEP分别为0.875 9、0.083 5。利用GWO算法对SVR模型中的参数c和g进行寻优，重新建立基于CARS特征光谱数据的SVR预测模型。最终，CARS-GWO-SVR模型的R2c和R2p分别提升为0.962 1和0.951 1，满足农产品的检测要求。
综上所述，该研究将高光谱图像技术用于大米霉菌菌落总数检测具有可行性，为其他农产品的霉菌检测提供新型方法，也为研制便携霉菌检测仪奠定理论基础。不足之处在于用于研究的样品数量有待提高以验证是否适用于更多种类的大米霉菌检测，有待进一步研究。
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