【摘 要】
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目的:建立皮革和头发中17种蛋白水解氨基酸的快速高效液相色谱分析方法。方法:氨基酸用AccQ Tag衍生试剂衍生后,用Acclaim C18(4.6 mm×150 mm,5μm)柱分离,三元梯度洗脱。三
【机 构】
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浙江树人大学生物与环境工程学院; 戴安中国有限公司上海应用实验室;
【基金项目】
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浙江省自然科学基金(No.Y5100280,No.Y4090078)
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目的:建立皮革和头发中17种蛋白水解氨基酸的快速高效液相色谱分析方法。方法:氨基酸用AccQ Tag衍生试剂衍生后,用Acclaim C18(4.6 mm×150 mm,5μm)柱分离,三元梯度洗脱。三元流动相为pH为4.45的140 mmol.L-1醋酸钠溶液、乙腈-水(60∶40,v/v)、pH为4.95的140 mmol.L-1醋酸钠溶液,以紫外检测器检测,在32 min内可简单快速地完成17种氨基酸的分析。结果:17种氨基酸衍生物保留时间的RSD≤1.1%(n=5),峰面积的RSD≤5.0%(n=5)。方法检测限(S/N=3)为2.92~4.51 pmol,线性范围2.5~500μmol.L-1(其中胱胺酸为1.25~250μmol.L-1),相关系数R2≥0.998,皮革样品加标回收率在80.1%~102.3%,头发样品加标回收率在85.3%~103.2%。结论:该方法不仅简化了流动相的配制过程,降低了实验成本,而且专属性高,样品基体干扰小,可完全满足皮革和头发水解液中氨基酸的测定。
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