1株脂肪酶产生菌的筛选鉴定及其脂肪酶基因的克隆表达

来源 :华中师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:liust4258
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从武汉市郊蓖麻地土壤中分离到1株产脂肪酶菌株,结合形态观察和生理生化鉴定,扩增16S rDNA并测序,运用Blast比对构建了进化树,发现该菌与粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的同源性高达99%,初步鉴定该菌属于沙雷氏菌属(Serratia),命名为Serratia sp.HS-L5.克隆了脂肪酶基因HS-Lip5,该基因全长1 842 bp,编码氨基酸614个.序列经Blast比对分析发现与Serratiamarcescens SM6的lipA序列的同源性高达98%,经氨基酸序列初步分析,发现Serratia sp.HS-L5的氨基酸序列包含脂肪酶共有序列-G-X-S-X-G-.将HS-Lip5基因克隆到表达载体pET-28a,并在E.coli中获得了表达.
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